同型半胱氨酸诱导大鼠主动脉平滑肌细胞依赖正常T细胞激活和分泌的因子、趋化因子受体1的表达和机制探讨

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)是否通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路诱导大鼠主动脉平滑肌细胞表达依赖正常T细胞激活和分泌的因子(RANTES)和其趋化因子受体1(CCR1)及辛伐他汀的治疗作用。方法将26只健康8周龄SD雄性大鼠随机分为正常对照组、高蛋氨酸饮食组和辛伐他汀治疗组。正常对照组给予普通饲料喂养;高蛋氨酸饮食组以普通饲料中添加质量分数2%的蛋氨酸喂养;辛伐他汀治疗组以高蛋氨酸饮食组饲料喂养4周后,每天以5 mg.kg-1的辛伐他汀灌胃,并继续给予高蛋氨酸饮食组饲料。12周后采用高效液相色谱法检测血浆Hcy浓度,苏木素-伊红(HE)和油红"O"染色观察胸主动脉形态学变化,采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠胸主动脉平滑肌细胞中RANTES、CCR1蛋白和mRNA的表达;采用Western blotting检测大鼠胸主脉平滑肌细胞中p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白的表达。结果蛋氨酸饮食组血浆Hcy浓度(80.79±23.86)mmol.L-1高于正常对照组(9.47±4.55)mmol.L-1和辛伐他汀治疗组(53.94±12.24)mmol.L-1(P<0.01)。HE染色显示高蛋氨酸饮食组局部内皮细胞坏死脱落,内膜下可见泡沫细胞。油红"O"染色显示高蛋氨酸饮食组胸主动脉内膜下局部呈红色。高蛋氨酸饮食组RANTES蛋白表达的平均灰度值(100.54±15.31)低于正常对照组(114.25±10.73)(P<0.01)和辛伐他汀治疗组(113.12±10.86)(P<0.05)。高蛋氨酸饮食组CCR1蛋白表达的平均灰度值(120.12±7.71)低于正常对照组(124.31±9.44)(P<0.01)和辛伐他汀治疗组(123.62±8.32)(P<0.05)。高蛋氨酸饮食组大鼠胸主动脉平滑肌细胞中RANTES和CCR1 mRNA的表达分别为0.93±0.02、1.77±0.40,均高于其在正常对照组的表达(0.45±0.00、1.02±0.04)(P<0.01),并高于在辛伐他汀治疗组中的表达(0.69±0.01、1.22±0.53)(P<0.05)。p38 MAPK在各组大鼠动脉平滑肌细胞均有表达但差别无统计学意义(P>0.05);p-p38 MAPK在高蛋氨酸饮食组的平均灰度值为95.74±0.02,低于正常对照组(160.60±3.54)(P<0.01)和辛伐他汀治疗组(155.94±0.07)(P<0.05)。结论高蛋氨酸饮食能引起大鼠高同型半胱氨酸血症(HHcy),促进大鼠主动脉平滑肌细胞中RANTES及CCR1的表达,诱导动脉粥样硬化(AS)的形成,p38 MAPK通路可能参与了此过程。辛伐他汀可以抑制这一过程,减缓AS的发生发展。

Homocysteine induced the expressions of regulated upon activation normal T expression and secretion and chemokine receptor-1 in the arterial smooth muscle cell of rats and its mechanism

Objective To investigate whether homocysteine(Hcy) induced the expressions of regulated upon activation normal T expression and secretion(RANTES) and its receptor chemoattractant cytokine receptor-1(CCR1)through p38 mitogen activated protein kinase(p38 MAPK) pathway in the arterial smooth muscle cells of the rats.Methods Twenty-six of healthy 8-week-old SD male rats were randomly divided into normal control group,high methionine diet group and simvastatin treatment group.The rats of normal control group wer...