| 2型登革病毒诱导RAW264.7细胞凋亡的机制及凋亡对病毒复制的影响 |
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| 作者姓名： | 张林 黄俊琪 |
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| 作者单位： | 1.中山大学中山医学院免疫学研究所,教育部热带病防治研究重点实验室,广东,广州,510080 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（No.30872350;No.31370870）;广东省自然科学基金资助项目(No.S201302001300;No.S2012010009050);广东省科技计划（No.2010B050700008;No.2011B040300022）;广州市科技计划（No.2011J4100084）;2010年中山大学高校基本科研业务费青年培育项目（No.10ykpy31） |
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| 摘 要： | 目的：探讨2型登革病毒（DENV2）感染能否诱导RAW264.7细胞凋亡,并初步探讨凋亡对病毒复制的影响。方法：用DENV2感染RAW264.7细胞,MTT检测细胞活性,Hoechst33342染色检测细胞核变化,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,Westernblotting检测caspase-3和caspase-8活化片段的变化,比色法检测caspase-9活性变化,JC-1染色检测线粒体膜电位变化,Z-VAD-FMK抑制细胞凋亡后以TCID50检测感染细胞上清病毒滴度。结果：DENV2感染RAW264.7细胞24h、36h及48h后细胞活性受到抑制,免疫荧光检测有核固缩现象,流式细胞术检测发现病毒感染诱导了细胞凋亡,Westernblotting检测发现活化caspase-3和caspase-8的表达增加,caspase-9活性也增加,JC-1染色发现病毒感染诱导RAW264.7细胞线粒体膜电位降低,用Z-VAD-FMK抑制凋亡后感染细胞上清病毒滴度增加。结论：登革病毒感染可以通过内、外源性途径诱导RAW264.7细胞发生凋亡;凋亡发生抑制了病毒的产生。
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| 关 键 词： | 登革病毒 细胞凋亡 RAW264.7 细胞 |
| 收稿时间： | 2013-06-13 |
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