ID-LC/MS/MS方法测量血清未结合雌三醇的协作研究

摘要：目的用同位素稀释液相色谱串联质谱（ID-LC/MS/MS）候选参考方法进行实验室间血清未结合雌三醇（uE3）协作研究，通过该研究进一步确认方法的性能特征（正确度和精密度），并将该方法在国内参考实验室推广，推动uE3标准化进程。方法依据ISO/WD 15725-1和GB/T 6379标准，拟定我国血清uE3协作研究方案。协作研究分为两个阶段：初步试验和正式试验，共9家参考实验室参加。按要求收集5个浓度水平样品并进行均匀性评价，分发到各实验室，每个样品重复测量5次，连续测量3天。计算各实验室测量结果的偏移和精密度。测量结果采用格拉布斯（Grubbs）检验和柯克伦（Cochran）检验，识别离群值和离群实验室。根据合格实验室的结果计算靶值，并向离群实验室和偏出允许范围的实验室提供整改建议。结果（1）样品均匀性评价，所有样品测量结果计算F值均小于F0.05（9, 20）临界值，样品中uE3是均匀的。（2）初步试验：Grubbs检验，1个实验室测量结果为离群值；Cochran检验2个实验室检验结果为离群值。剔除离群值后计算靶值，分别为2017E301:（22.08±0.24）nmol/L；2017E302：（33.46±1.67）nmol/L。2个实验室结果超出允许范围。（3）正式试验：Grubbs检验，所有实验室测量结果均未检出离群值。Cochran检验3个实验室数据出现离群值。剔除离群值后计算靶值，分别为2017E303:（10.36±0.35）nmol/L；2017E304:（15.47±0.26）nmol/L；2017E305:（46.97±1.19）nmol/L。；各实验室间测量结果不精密度分别为（1.14%～2.21%，0.79%～1.93%，0.60%～2.09%），测量结果偏移分别为（-6.18%～4.83%，-2.26%～2.39%，-4.19%～4.07%）。结论通过组织开展协作研究，确认了各参考实验室通过协作研究方案能够快速建立并运行uE3候选参考方法，除个别实验室外各实验室的检测性能满足预定要求（不精密度<3.0%，偏移<7.5%），进一步确认了该方法的性能和各实验室运行参考方法的能力。通过初步研究和正式研究对研究方案的各实验环节进行了验证和完善；推动了uE3项目参考方法在我国参考实验室的运行，为后续厂商试剂主校准品联合定值或标准物质研制搭建了平台，促进uE3项目的标准化。

Collaborative Studyingof ID-LC/MS/MS Methods for uE3