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大肠杆菌表面CS3菌毛展示随机肽库的构建
引用本文:刘向昕,袁盛凌,展德文,郑继平,刘纯杰,王芃,王令春,张兆山. 大肠杆菌表面CS3菌毛展示随机肽库的构建[J]. 世界华人消化杂志, 2006, 14(2): 158-162
作者姓名:刘向昕  袁盛凌  展德文  郑继平  刘纯杰  王芃  王令春  张兆山
作者单位:中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所,北京市,100071;中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所,北京市,100071;中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所,北京市,100071;中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所,北京市,100071;中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所,北京市,100071;中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所,北京市,100071;中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所,北京市,100071;中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所,北京市,100071
摘    要:目的:在肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛表面构建 10肽随机肽库.方法:首先将原有的单酶切CS3菌毛呈现载体改造为双酶切载体,并证实改造后的载体能正确形成CS3菌毛.同时设计合成2条寡核苷酸序列,链1含有1个10肽随机编码序列(NNS)10, 链2可与链1的3′端互补.两条链经过退火、延伸、酶切和回收与经过同样酶切的呈现载体连接,连接产物纯化后分多次电击转化,获得随机肽库.随机挑选10个克隆进行测序并对测序结果进行分析.结果:获得1个库容量为1.8×106大小的随机肽库.测序结果显示,所构建肽库的基本框架与预期设计相符,4个寡核苷酸出现的频率也与理论值相接近.结论:在肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛表面成功构建库容量为1.8×106大小的10肽随机肽库.为下一步利用肽库进行筛选奠定了基础.

关 键 词:CS3菌毛  细菌表面展示  随机肽库
修稿时间:2005-11-08

Construction of a CS3 fimbria-displayed random peptide library on Escherichia coli cell surface
Xiang-Xin Liu,Sheng-Ling Yuan,De-Wen Zhan,Ji-Ping Zheng,Chun-Jie Liu,Peng Wang,Ling-Chun Wang,Zhao-Shan Zhang. Construction of a CS3 fimbria-displayed random peptide library on Escherichia coli cell surface[J]. World Chinese Journal of Digestology, 2006, 14(2): 158-162
Authors:Xiang-Xin Liu  Sheng-Ling Yuan  De-Wen Zhan  Ji-Ping Zheng  Chun-Jie Liu  Peng Wang  Ling-Chun Wang  Zhao-Shan Zhang
Abstract:
Keywords:CS3 fimbria  Bacterial surface display  Random peptide library
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