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热休克凋亡食管癌细胞负载自体树突状细胞制备及其表型特征的分析
引用本文:孙振宇,李成万,顾敏威,孙琦,赵永,陆晓.热休克凋亡食管癌细胞负载自体树突状细胞制备及其表型特征的分析[J].中华肿瘤防治杂志,2011,18(2).
作者姓名:孙振宇  李成万  顾敏威  孙琦  赵永  陆晓
作者单位:南通大学第三附属医院,无锡市第三人民医院胸外科,江苏,无锡,214062
摘    要:目的:建立自体热休克凋亡食管癌细胞抗原制备、树突状细胞(DC)体外诱导以及抗原负载方法,为DC肿瘤疫苗的临床应用提供技术基础.方法:采用酶消化法从手术切除的食管癌新鲜组织获得单细胞悬液,热休克后用桦脂酸诱导其凋亡制备成细胞抗原;采用人工肝素抗凝采集外周静脉血,分离单个核细胞(PBMC),贴壁法获得单核细胞,经GM-CSF与IL-4体外诱导成未成熟树突状细胞(imDC);负载细胞抗原后制备成DC肿瘤疫苗,并对DC疫苗的形态、数量及表型特征进行分析.结果:肿瘤细胞抗原每克组织得率(9.89±2.46)×106,平均凋亡率(67.60±3.23)%.imDC活率>95%,imDC表型分析为CD11c+HLA-DR+、CD11c+CD80+、CD11c+CD83+和CD11c+CD86+,表达率分别为(88.30±3.59)%、(1.25±0.55)%、(6.13±1.79)%和(72.90±5.01)%.DC疫苗活率>95%,DC疫苗表型为CD11c+HLA-DR+CD11c+CD80+、CD11c+CD83+和CD11c+CD86+,表达率分别为(89.60±3.91)%、(34.20±3.85)%、(64.90±8.05)%和(86.10±6.22)%.负载自体抗原DC诱导CTL杀伤自体肿瘤细胞的杀伤率为(65.90±6.25)%,明显高于杀伤食管癌肿瘤细胞株的杀伤率(32.56±2.68)%],P<0.01.结论:本方法稳定、安全及可靠,可制备出在体外诱导特异性CTL的DC肿瘤疫苗.

关 键 词:食管肿瘤/免疫学  癌症疫苗/免疫学  抗原  CD  树突细PA/免疫学

Preparation and characterize of autologous dendritic cells loaded by heat shocked apoptotic esophagus cancer cells
SUN Zhen-yu,LI Cheng-wan,GU Min-wei,SUN Qi,ZHAO Yong,LU Xiao.Preparation and characterize of autologous dendritic cells loaded by heat shocked apoptotic esophagus cancer cells[J].Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment,2011,18(2).
Authors:SUN Zhen-yu  LI Cheng-wan  GU Min-wei  SUN Qi  ZHAO Yong  LU Xiao
Abstract:
Keywords:
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