基于Bax、Bcl-2、与Caspase-3探讨凉血固元汤对大鼠急性胃辐射伤的作用机制

目的通过动物实验,探讨中药复方凉血固元汤对急性辐射伤大鼠胃黏膜细胞凋亡的作用及机制。方法选用雌性SD大鼠30只,取5只作为空白组,其余大鼠用~(60)Co-γ射线照射制造大鼠急性胃辐射伤模型,取造模成功20只,随机分为4组:单纯照射组、地塞米松组及中药低、高剂量组,每日观察大鼠生存状况,在照射后第3天麻醉、处死大鼠,行胃组织HE染色并评分,采用TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡,Western Blot法检测B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3, Caspase-3)的蛋白表达,PCR法检测Bax、Bcl-2与Caspase-3 mRNA表达量。结果照射后各组大鼠均出现不同程度的稀便,以单纯照射组明显,中药高剂量组呈不成型的软便。病理观察见单纯照射组细胞间隙扩大,腺体排列不整齐,黏膜充血、水肿明显,各治疗组损伤程度有所减轻,损伤评分均高于空白组(P0.01),中药高剂量组胃黏膜轻度充血、水肿,损伤评分低于单纯照射组(P0.05)。TUNEL表达结果显示,中药高剂量组TUNEL阳性细胞表达数低于单纯照射组(P0.05)。在蛋白表达方面,单纯照射组Bax表达量明显高于空白组(P0.01),中药高剂量组较单纯照射组降低(P0.05);单纯照射组、地塞米松组及中药低剂量组Caspase-3及Bax/Bcl-2较空白组均升高(P0.05或P0.01),中药高剂量组低于单纯照射组(P0.05或P0.01)。各组mRNA表达比较,单纯照射组、地塞米松组和中药低剂量组中Bax mRNA相对表达量及单纯照射组和地塞米松组Caspase-3 mRNA相对表达量较空白组均升高(P0.05或P0.01),而中药低、高剂量组能降低Bax mRNA和Caspase-3 mRNA表达,以中药高剂量组最为显著(P0.01)。结论凉血固元汤能减轻由~(60)Co-γ射线引发的大鼠急性胃辐射伤,其作用机制可能与其抑制Bax与Caspase-3表达,降低Bax/Bcl-2,从而抑制细胞凋亡有关。