| 查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 陈亮 严延生 等. 查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因的克隆与表达[J]. 中国人兽共患病杂志, 2001, 17(4): 13-16 |
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| 作者姓名： | 陈亮 严延生 等 |
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| 作者单位： | 陈亮（福建省卫生防疫站福州 350001） 严延生（福建省卫生防疫站福州 350001） 翁育伟（福建省卫生防疫站福州 350001） 王惠榕（福建省卫生防疫站福州 350001） 于恩庶（福建省卫生防疫站福州 350001） |
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| 摘 要： | 目的 克隆查菲埃立克体120kDa膜表面免疫决定性蛋白基因，并使之在原核表达系统中表达。方法 查菲埃立克体分离株（91HE17）感染DH82细胞40天后收集DH82细胞。根据查菲埃立克体P120蛋白基因序列设计特异性引物，套式PCR扩增查菲埃立允体P120蛋白基因部分片段，将PCR扩增产物用BamHⅠ和EcoRⅠ限制性内切酶双酶切后与pUC18载体连接，在获得阳性克隆子后用限制性内切酶将克隆片段切下，定向手稿原核表达载体pProEX HTb构建pProEX HTb/P120重组质粒。将重组质粒转化E.coli DH5α，并使之在IPTG的诱导下进行蛋白质表达。结果 裁短成1080bp的查菲埃立克体P120蛋白基因克隆到pUC18载体，用IPTG诱导pProEX HTb/P120重组质粒转化的E.coli DH5α，表达一分子量大小约为47kDa的融合蛋白。结论 查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因能在原核表达系统中表达，为诊断试剂盒的研制及其它研究工作提供了基础。
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| 关 键 词： | 查菲埃立克体 膜蛋白抗原 基因克隆 表达 |
| 文章编号： | 1002-2694(2001)05-0013-04 |
| 修稿时间： | 2001-06-14 |
CLONGING AND EXPRESSION OF THE GENE ENCODING 120- kDa ANTIGEN PROTEIN OF EHRLICHIA CHAFFEENSIS |
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| CHEN Liang,YAN Yansheng,WENG Yuwei,WANG Huirong,YU Enshu. CLONGING AND EXPRESSION OF THE GENE ENCODING 120- kDa ANTIGEN PROTEIN OF EHRLICHIA CHAFFEENSIS[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2001, 17(4): 13-16 |
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| Authors: | CHEN Liang YAN Yansheng WENG Yuwei WANG Huirong YU Enshu |
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| Keywords: | Ehrlichia chaffeensis Membrane protein antigen Gene clone Expression |
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