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| 利用PCR技术构建GM-CSF/Fc_(γ2)~-融合蛋白真核表达载体 | |
| 作者姓名： | 宁金鹰 王尊荣 许佐良 |
| 作者单位： | 1. 济宁医学院组织学与胚胎学教研室 2. 济宁医学院神经病学教研室 3. 北京大学肿瘤学院 |
| 摘 要： | 目的 对融合基因GM -CSF Fcγ2 进行定点突变 ,去除其补体结合位点 ,构建GM -CSF Fcγ2-融合蛋白真核表达载体。方法 通过设计突变引物 ,利用PCR定点突变技术扩增融合基因GM -CSF Fcγ2-。并通过T -A克隆策略 ,把突变后的融合基因GM -CSF Fcγ2-重组到真核表达载体pRc CMV2中 ,构建真核表达质粒pRc CMV2 GM -CSF Fcγ2-并经过酶切和测序确证。结果 成功对融合基因GM -CSF Fcγ2-进行了突变 ,构建了真核表达载体pRc CMV2 GM -CSF Fcγ2-。结论 利用该PCR方法进行基因定点突变可行 |
| 关 键 词： | 融合蛋白 定点突变 PCR 基因克隆 |
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