| 尤文肉瘤基因免疫治疗的研究 |
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| 引用本文： | 郭义,郭卫,汤小东,高占成,何湘君. 尤文肉瘤基因免疫治疗的研究[J]. 中华实验外科杂志, 2004, 21(7): 848-851,F003 |
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| 作者姓名： | 郭义 郭卫 汤小东 高占成 何湘君 |
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| 作者单位： | 100044,北京大学人民医院骨肿瘤研究室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30000763) |
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| 摘 要： | 目的检测尤文肉瘤融合基因EWSFLI1和人粒单核细胞集落刺激因子(hGMCSF)基因修饰的树突细胞(DC)疫苗对尤文肉瘤细胞株A673的杀伤作用。方法利用hGMCSF腺病毒(AdhGMCSF),在1000U/mlIL4作用下,从外周血单个核细胞(PBMC)诱生树突细胞(DC)并对其表型进行流氏细胞仪(FCM)分析,通过同种混合淋巴细胞反应以检测其免疫刺激活性。在lipofectamine的介导下,将含有尤文肉瘤融合基因EWSFLI1的真核表达质粒pCA13/EWSFLI1转染DC,通过RTPCR检测EWSFLI1的表达,并通过乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测其对A673细胞的杀伤作用。结果应用AdhGMCSF从PBMC成功诱生出CD83、CD80、CD86及HLADR高表达,CD14低表达的DC,其对同种淋巴细胞有很强的免疫刺激活性。pCA13/EWSFLI1转染DC后,RTPCR检测DC中有EWSFLI1mRNA的表达。杀伤试验结果表明,AdhGMCSF诱生、EWSFLI1修饰的DC,体外诱导抗原特异的CTL,效靶比为20∶1时对A673细胞杀伤率为(29.9500±0.0117)%,高于对照组(P<0.01)。结论AdhGMCSF能够成功地从PBMC中诱生出有功能的DC。真核表达质粒pCA13/EWSFLI1在lipofectamine的介导下转染AdhGMCSF诱生的DC,能在DC中有效地表达。此EWSFLI1基因修饰的、AdhGMCSF诱生的DC体外致敏自体T淋巴细胞,生成抗原特异CTL,对尤文肉瘤细胞A673有一定的杀伤作用
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| 关 键 词： | 尤文肉瘤 基因治疗 树突细胞 腺病毒 |
In vitro study of anti-tumor immunity of the EWS-FLI1 gene and hGM-CSF gene modified-dendritic cells |
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| GUO Yi,GUO Wei,TANG Xiao dong,et al.. In vitro study of anti-tumor immunity of the EWS-FLI1 gene and hGM-CSF gene modified-dendritic cells[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2004, 21(7): 848-851,F003 |
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| Authors: | GUO Yi GUO Wei TANG Xiao dong et al. |
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| Affiliation: | GUO Yi,GUO Wei,TANG Xiao dong,et al.Bone Tumor Research Laboratory,People's Hospital,Peking University,Beijing 100044,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ewing sarcoma Gene therapy Dendritic cell Adenovirus |
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