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尤文肉瘤基因免疫治疗的研究
引用本文:郭义,郭卫,汤小东,高占成,何湘君.尤文肉瘤基因免疫治疗的研究[J].中华实验外科杂志,2004,21(7):848-851,F003.
作者姓名:郭义  郭卫  汤小东  高占成  何湘君
作者单位:100044,北京大学人民医院骨肿瘤研究室
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30000763)
摘    要:目的检测尤文肉瘤融合基因EWSFLI1和人粒单核细胞集落刺激因子(hGMCSF)基因修饰的树突细胞(DC)疫苗对尤文肉瘤细胞株A673的杀伤作用。方法利用hGMCSF腺病毒(AdhGMCSF),在1000U/mlIL4作用下,从外周血单个核细胞(PBMC)诱生树突细胞(DC)并对其表型进行流氏细胞仪(FCM)分析,通过同种混合淋巴细胞反应以检测其免疫刺激活性。在lipofectamine的介导下,将含有尤文肉瘤融合基因EWSFLI1的真核表达质粒pCA13/EWSFLI1转染DC,通过RTPCR检测EWSFLI1的表达,并通过乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测其对A673细胞的杀伤作用。结果应用AdhGMCSF从PBMC成功诱生出CD83、CD80、CD86及HLADR高表达,CD14低表达的DC,其对同种淋巴细胞有很强的免疫刺激活性。pCA13/EWSFLI1转染DC后,RTPCR检测DC中有EWSFLI1mRNA的表达。杀伤试验结果表明,AdhGMCSF诱生、EWSFLI1修饰的DC,体外诱导抗原特异的CTL,效靶比为20∶1时对A673细胞杀伤率为(29.9500±0.0117)%,高于对照组(P<0.01)。结论AdhGMCSF能够成功地从PBMC中诱生出有功能的DC。真核表达质粒pCA13/EWSFLI1在lipofectamine的介导下转染AdhGMCSF诱生的DC,能在DC中有效地表达。此EWSFLI1基因修饰的、AdhGMCSF诱生的DC体外致敏自体T淋巴细胞,生成抗原特异CTL,对尤文肉瘤细胞A673有一定的杀伤作用

关 键 词:尤文肉瘤  基因治疗  树突细胞  腺病毒

In vitro study of anti-tumor immunity of the EWS-FLI1 gene and hGM-CSF gene modified-dendritic cells
GUO Yi,GUO Wei,TANG Xiao dong,et al..In vitro study of anti-tumor immunity of the EWS-FLI1 gene and hGM-CSF gene modified-dendritic cells[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2004,21(7):848-851,F003.
Authors:GUO Yi  GUO Wei  TANG Xiao dong  
Institution:GUO Yi,GUO Wei,TANG Xiao dong,et al.Bone Tumor Research Laboratory,People's Hospital,Peking University,Beijing 100044,China
Abstract:
Keywords:Ewing sarcoma  Gene therapy  Dendritic cell  Adenovirus
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