树突状细胞与尤文肉瘤细胞融合诱导抗肿瘤免疫应答的体外研究 |
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引用本文: | 唐顺,郭卫,郭义,曲华毅,李大森.树突状细胞与尤文肉瘤细胞融合诱导抗肿瘤免疫应答的体外研究[J].中华外科杂志,2005,43(12):803-806. |
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作者姓名: | 唐顺 郭卫 郭义 曲华毅 李大森 |
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作者单位: | 北京大学人民医院骨与软组织肿瘤治疗中心
100044(唐顺,郭卫,郭义,曲华毅),北京大学人民医院骨与软组织肿瘤治疗中心 100044(李大森) |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30371432) |
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摘 要: | 目的检测尤文肉瘤细胞A673和树突细胞(DC)融合构建的肿瘤疫苗对尤文肉瘤细胞株A673的杀伤作用。方法应用促融合剂PEG对尤文肉瘤A673细胞和从外周血单个核细胞(PBMC)诱生的树突细胞进行融合。利用细胞因子hGMCSF和hIL4从PBMC诱生DC,并对其表型进行流式细胞仪(FCM)分析,红色荧光染料PKH26标记A673细胞,绿色荧光染料PKH67标记DC,应用促融合剂PEG融合后光镜及电镜观察DC细胞和融合细胞形态,FCM检测融合效率,通过同种混合淋巴细胞反应检测其免疫刺激活性。通过IFNγELISA法产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的量,通过51Cr细胞杀伤试验检测融合细胞对A673细胞的杀伤作用。结果FCM检测出从PBMC成功诱生出CD83、CD80、CD86及HLADR高表达的成熟DC。DCs/A673融合细胞的融合效率达到23%,同种混合淋巴细胞反应显示DCs/A673融合细胞有很强的免疫刺激活性。IFNγ分泌检测显示DCs/A673融合细胞组较对照组产生CTL水平显著增高。51Cr释放法检测融合细胞体外诱导抗原特异的CTL,融合细胞激活的CTL对肿瘤细胞系A673细胞的杀伤作用强于DCA673混合组、DC组、A673组的CTL(P<0.05),作用较对照各组显著增强。结论DC与A673细胞融合体外致敏自体T淋巴细胞能生成抗原特异CTL对尤文肉瘤细胞A673有一定的杀伤作用。
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关 键 词: | 细胞融合 尤文肉瘤 肿瘤免疫应答 树突状细胞 体外研究 混合淋巴细胞反应 细胞毒性T淋巴细胞 外周血单个核细胞 ^51Cr释放法 免疫刺激活性 hGM-CSF FCM检测 IFN-γ 杀伤作用 融合细胞 ELISA法 HLA-DR 树突细胞 肉瘤细胞 |
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