| 重组人胰岛素样生长因子1的制备 |
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| 引用本文： | 梁东春,左爱军,吴亚锋,郭刚,张镜宇.重组人胰岛素样生长因子1的制备[J].天津医药,2005,33(7):434-436. |
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| 作者姓名： | 梁东春 左爱军 吴亚锋 郭刚 张镜宇 |
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| 作者单位： | 300070,天津市内分泌研究所 |
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| 基金项目： | 天津市自然科学基金重点项目(项目编号:033801611) |
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| 摘 要： | 目的：建立人胰岛素样生长因子1(IGF—1)基因大肠杆菌高效表达系统及rhIGF—1的初步纯化方法。方法：将人IGF—1基因克隆人原核表达质粒载体pBV220，重组质粒转化大肠杆菌DH5α，温度诱导表达，Western Blot对表达产物进行鉴定。超滤离心纯化rhIGF-1，纯化产物行高效液相色谱分析。H^3-TdR掺人法测定所制备rhIGF—1的促细胞增殖活性。结果：成功构建了重组质粒pBV—IGF—1，聚丙烯酰胺凝胶电泳可见与预期7．5ku大小相符的蛋白条带，Western Blot证实该条带即为rhIGF—1。超滤离心一步纯化后rhIGF—1纯度即可达95％以上。H^3-TdR结果显示，所制备的rhIGF—1可促进体外培养成肌细胞增殖。结论：成功建立了rhIGF-1的制备及纯化方法，表达产物经体外试验证实具有促细胞增殖的生物活性。
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| 关 键 词： | 人胰岛素样生长因子1 制备 Western rhIGF-1 聚丙烯酰胺凝胶电泳 高效液相色谱分析 pBV220 温度诱导表达 细胞增殖活性 成肌细胞增殖 纯化方法 大肠杆菌 表达产物 Blot 表达系统 质粒载体 原核表达 DH5α 质粒转化 纯化产物 |
Preparation of Recombinant Human Insulin-like Growth Factor 1 |
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| LIANG Dongchun,Zuo Aijun,WU Yafeng,GUO Gang,ZHANG Jingyu.Preparation of Recombinant Human Insulin-like Growth Factor 1[J].Tianjin Medical Journal,2005,33(7):434-436. |
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| Authors: | LIANG Dongchun Zuo Aijun WU Yafeng GUO Gang ZHANG Jingyu |
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