| 脂肪组织来源干细胞的成骨诱导和外源性基因转染表达研究 |
| |
| 引用本文： | 黄宏,张波,朱方强,孙宏振,冯帅南,王正国,朱佩芳.脂肪组织来源干细胞的成骨诱导和外源性基因转染表达研究[J].感染、炎症、修复,2008,9(2):77-81. |
| |
| 作者姓名： | 黄宏 张波 朱方强 孙宏振 冯帅南 王正国 朱佩芳 |
| |
| 作者单位： | 第三军医大学大坪医院野战外科研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042 |
| |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
| |
| 摘 要： | 目的：探讨脂肪组织来源的干细胞（ADSCs）表达外源性基因的可能性。方法：取小香猪腹部皮下脂肪组织，通过Ⅰ型胶原酶消化、离心等方法分离培养ADSCs，再经原代培养和传代培养。利用成骨诱导剂（10^-7mol/L地塞米松、10mmol/Lβ-甘油磷酸钠和50mg/L左旋抗坏血酸）诱导ADSCs向成骨方向分化，观察其生长形态，并通过Gomori改良钙钴法和von Kossa染色对其成骨表型进行鉴定。另设一对照组，培养基中不加入成骨诱导剂。脂质体介导人内皮细胞生长因子（hVEGF）和骨形态发生蛋白-2（hBMP-2）转染ADSCs细胞，观察转染后细胞形态和生长情况，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫细胞化学方法分别检测hVEGF mRNA、BMP-2 mRNA及其蛋白质表达。结果：成骨诱导剂能显著诱导体外培养的ADSCs向成骨细胞分化，诱导19d的ADSCs体积增大，细胞由梭形变为多边形，Gomori改良钙钴法染色显示其胞浆内富含碱性磷酸酶颗粒，诱导15d和19d，碱性磷酸酶阳性细胞分别为（25.0±7.5）%和（49.7±6.9）%。von Kossa染色表明聚集的细胞团中央有钙化结节形成。RT-PCR检测证实，经质粒转染的ADSCs中hVEGF和hBMP-2基因表达明显增强，对照组呈弱表达。免疫组织化学检测证实转染ADSCs内有棕色的阳性颗粒出现，未转染细胞则呈现阴性。结论：ADSCs能被成功诱导为成骨细胞，hVEGF和hBMP-2基因能成功地转入ADSCs并表达，这为促进骨组织工程的血管化和成骨活性奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 脂肪组织 干细胞 内皮细胞生长因子 骨形态发生蛋白-2 细胞转染 基因表达 |
Study on adilmse-derived stem cells in trans-differentiation into osteoblast in vitro and its expression of trausfection genes |
| |
| Huang Hong,Zhang Bo,Zhu Fangqiang,et al..Study on adilmse-derived stem cells in trans-differentiation into osteoblast in vitro and its expression of trausfection genes[J].Infection Inflammation Repair,2008,9(2):77-81. |
| |
| Authors: | Huang Hong Zhang Bo Zhu Fangqiang |
| |
| Institution: | Huang Hong,Zhang Bo,Zhu Fangqiang,et al. State Key Laboratory of Trauma,Burns and Combined Injury,Research Institute for Traffic Medicine,Department 4,Institute of Field Surgery Research,Daping Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400042,China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Adipose Stromal cells Endothelial growth factors Bone morphogenetic protein-2 Transfection Gene expression |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
