γ-羟基丁酸对脑缺血再灌注后海马区γ-氨基丁酸及其A型受体α1亚型的影响

目的：观察γ-羟基丁酸对局部脑缺血再灌注大鼠海马CA1区γ-氨基丁酸及氨基丁酸A型受体α1亚型的影响，探讨其脑保护作用机制。方法：实验于2004-05～01／10-30在哈尔滨医科大学形态学实验中心完成。选用健康成年雄性Wistar大鼠60只，随机分为假手术组（n=10）、模型组（n=25）、治疗组（n=25），模型组和治疗组又各分5个时间点：即缺血1h再灌注1．5h，3h，6h，12h，24h，每个时间点5只。采用大脑中动脉拴线法，建立大鼠局部脑缺血再灌注模型，假手术组仅暴露颈内动脉，不阻断血流，24h后断头取脑。治疗组于再灌注前10min给予γ-羟基丁酸钠（GHBA）3.5mL／kg腹腔注射。模型组和治疗组分别于缺血1h再灌注1．5h，3h，6h，12h，24h，各取5只大鼠处死，断头取脑，置于40g／L多聚甲醛中固定，常规石蜡包埋，行5μm厚连续冠状切，用于苏木精-伊红染色及免疫组化检测。比较分析各组在不同时让点的γ-氨基丁酸能神经元及氨基丁酸A受体α-亚型阳性细胞数。结果：纳入动物共60只，手术过程及术后因麻醉过深、失血过多等原因，模型组死亡2只，治疗组死亡3只，进入结果分析11组共55只。①苏木精-伊红染色光镜观察结果：假手术组形态学改变不明显。模型组缺血区淡染，细胞数明显减少，但结构尚存，缺血周边细胞体积缩小，胞膜皱缩，核固缩深染，细胞间隙增大，海马区变化尤为显著。治疗组较模型组细胞数增多，细胞损害较轻。②海马CA1区γ-氨基丁酸能神经元免疫组化阳性细胞数：与假手术组比较，模型组与治疗组中缺血1h再灌注1．5h，3h，6h，12h，24h海马CA1区中氨基丁酸阳性神经元数量明显减少（P〈0．05），治疗组缺血1h再灌注6h及以后各组均显著高于相应模型组（P〈0．05）。③海马CA1区氨基丁酸A受体α1亚型免疫组化阳性细胞数：与假手术组比较，模型组、治疗组在中缺血1h再灌注12h及以后各组海马CA1区氨基丁酸A受体α1亚型免疫组化阳性细胞数明显减少（P〈0．05）；治疗组再灌注12h及以后各组均高于相应模型组（P〈0．05）。结论：γ-羟基丁酸可能是通过增加缺血再灌注后γ-氨基丁酸阳性神经元及氨基丁酸A受体α1亚型受体的表达来发挥脑保护作用。

Effect of gamma hydroxybutyrate on the expressions of gammaaminobytyric acid and its type A receptor alpha 1 in hippocampal CA1 of rats following focal cerebral ischemia reperfusion