| 一种检测小鼠T淋巴细胞中sjTRECs含量简易方法的研究 |
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| 引用本文： | 张华华,曾耀英.一种检测小鼠T淋巴细胞中sjTRECs含量简易方法的研究[J].哈尔滨医科大学学报,2005,39(2):114-117. |
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| 作者姓名： | 张华华 曾耀英 |
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| 作者单位： | 暨南大学,组织移植与免疫实验中心,广东,广州,510632;暨南大学,组织移植与免疫实验中心,广东,广州,510632 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目(G1999054303,G2000057006)，国家自然科学基金重点项目(30230350,39930230)，广东省“十五”重大科技专项(A302020204) |
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| 摘 要： | 目的建立一种快速、简单的检测小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的信号结合T细胞受体删除环(signal ioint TCR rearrangement excision circles，sjTRECs)水平的方法，并研究其准确性，以期推测初始T细胞含量从而评价胸腺功能。方法根据标准质粒荧光定量PCR的扩增曲线选择合适有效的扩增循环次数；优化PCR条件；梯度稀释的标准质粒(10^3—10^8拷贝)PCR扩增后使用图像分析软件包分析琼脂糖凝胶电泳的图像，测量PCR产物带的光密度，经统计获得标准曲线及方程。将样本的PCR产物带的光密度代入标准曲线方程，从而获得样本的sjTRECs水平读数，并和实时定量PCR结果比较。结果获得适合的PCR条件；成功建立可信度高的标准曲线；与实时定量PCR的检测结果比较，小鼠sjTRECs含量随年龄变化的趋势一致。结论成功建立研究方法，与实时定量PCR评价sjTRECs水平得到明显相似的结果，表明此方法可能成为TREC水平检测的一种有效可靠的分析方法。
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| 关 键 词： | sjTRECs 初始T细胞 胸腺功能 实时定量PCR |
| 文章编号： | 1000-1905(2005)02-0114-04 |
| 修稿时间： | 2004年10月25 |
A simple method for the measurement of sjTRECs levels in murine T lymphocytes |
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| ZHANG Hua-hua,ZENG Yao-ying.A simple method for the measurement of sjTRECs levels in murine T lymphocytes[J].Journal of Harbin Medical University,2005,39(2):114-117. |
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| Authors: | ZHANG Hua-hua ZENG Yao-ying |
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