| 摘 要： | 目的:通过了解整合素连接激酶(ILK)及心肌素(myocardin)在低氧性肺动脉高压(PAH)大鼠肺组织及肺血管中的表达,探讨ILK在低氧性肺动脉高压发病机制中的作用。方法:48只SD大鼠按随机数字表法分为常氧对照组和低氧1周、2周、4周组,低氧干预大鼠置于低氧仓内,氧浓度控制在(10.5±0.5)%,每日间断低氧8h(8:00~16:00)。测定各组大鼠肺动脉平均压(mPAP)、计算右室肥厚指数[右室/(左室+室间隔),RV/(LV+S)]、管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%);采用髓鞘碱性蛋白为底物通过液体闪烁仪测定ILK活性;实时定量PCR法测定肺动脉内ILK、糖原合成激酶3β(GSK-3β)及myocardin mRNA相对表达量;Western印迹法检测肺动脉及培养的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)胞质内ILK、GSK-3β及myocardin蛋白相对表达量。结果:低氧2周组mPAP、右室肥厚指数、WT%、WA%均显著高于常氧对照组(均P0.05),低氧4周组差异更为显著。低氧1周组肺动脉内ILK活性即明显下降达36%(P0.05),低氧2周、4周组ILK活性均较常氧对照组明显降低(均P0.05)。低氧4周组ILK mRNA和蛋白相对表达量均显著低于常氧对照组(均P0.05),myocardin mRNA和蛋白表达变化与ILK相似(均P0.05),而GSK-3β的mRNA和蛋白表达量则呈相反趋势,显著高于常氧对照组(均P0.05)。低氧培养PASMC 24h后ILK及myocardin蛋白表达明显低于常氧对照组,而GSK-3β蛋白水平则呈相反趋势,低氧可促进其表达增加(均P0.05)。结论:慢性低氧引起ILK活性和表达下调,使其下游靶点GSK-3β表达上调,进而降低myocardin表达水平,可能是导致PAH形成的重要机制。
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