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HSV-tk/GCV自杀基因系统对视网膜母细胞瘤的体外抗肿瘤效应
引用本文:李涛,张虹,王骞,梁峰,李伟,李贵刚,卢运萍. HSV-tk/GCV自杀基因系统对视网膜母细胞瘤的体外抗肿瘤效应[J]. 华中科技大学学报(医学版), 2003, 32(5): 533-537
作者姓名:李涛  张虹  王骞  梁峰  李伟  李贵刚  卢运萍
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,武汉,430030
2. 新加坡国立大学生物系,新加坡,119260
3. 武汉大学化学系,武汉,430072
4. 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心,武汉,430030
摘    要:目的 研究单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶/更昔洛韦(herpes simplex virus thymidine kinase/ganeyclov—ir,HSV—tk/GCV)自杀基因系统对视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)细胞的体外杀伤作用以及旁观者效应发生的机制。方法 应用脂质体将pCMV/hytk-IRES-hrGFP质粒导入HXO-Rb44细胞株。用潮霉素筛选出阳性细胞克隆并命名为HXO-Rb44/tk。RT—PCR鉴定hytk基因在HXO-Rb44/tk细胞中的转录结果。比较HXO-Rb44和HXO-Rb44/tk细胞的形态特征及生长特性。通过MTT法检测GCV对不同比例HXO-Rb44/tk和HXO-Rb44混合细胞的杀伤作用(“旁观者效应”)。并通过上清移换实验研究旁观者效应发生的机制。结果HXO-Rb44/tk细胞经RT—PCR可检测出530bp的hytk基因片段。HXO-Rb44/tk和HXO-Rb44细胞的形态特征及生长特性无明显差异。HXO-Rb44/tk细胞仅占很低比例时即可观察到明显的旁观者效应,而GCV作用的HXO-Rb44/tk细胞上清对HXO-Rb44细胞无杀伤作用。结论 HSV—tk基因转移联合GCV治疗可作为Rb基因治疗的一种有效方法,旁观者效应可能是GCV代谢产物通过缝隙连接进行细胞间转运来实现的。

关 键 词:HSV—tk/GCV 自杀基因系统 视网膜母细胞瘤 体外抗肿瘤效应 基因疗法 胸腺嘧啶核苷激酶

Antitumor Effects of HSV-tk/GCV Suicide Gene System for Retinoblastoma in vitro
Li Tao ,Zhang Hong ,Wang Qian et al. Antitumor Effects of HSV-tk/GCV Suicide Gene System for Retinoblastoma in vitro[J]. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Health Sciences), 2003, 32(5): 533-537
Authors:Li Tao   Zhang Hong   Wang Qian et al
Affiliation:Li Tao 1,Zhang Hong 1,Wang Qian 2 et al 1 Department of Ophthalmology,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030 2 Department of Biological Sciences,National University of Singapore,Singapore 119260
Abstract:
Keywords:retinoblastoma  gene therapy  thymidine kinase
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