| 酵母双杂交筛选雄激素受体辅助调节因子267-α(ARA267-α)的相互作用蛋白 |
| |
| 引用本文： | 汪欣,买铁军,牛亦农,王建伟,郭应禄. 酵母双杂交筛选雄激素受体辅助调节因子267-α(ARA267-α)的相互作用蛋白[J]. 北京大学学报(医学版), 2004, 36(5): 514-518 |
| |
| 作者姓名： | 汪欣 买铁军 牛亦农 王建伟 郭应禄 |
| |
| 作者单位： | 1. 北京大学第一医院,普外科,北京,100034
2. 北京大学第一医院,泌尿外科,北京,100034 |
| |
| 摘 要： | 目的:通过酵母双杂交系统筛选与雄激素受体辅助调节因子267-α(androgen receptor-associated coregulator 267-α,ARA267-α)有相互作用的蛋白质,为研究ARA267-α的生理功能寻找证据和方向.方法:以能表达ARA267-α中4个PHD(p1ant homeodomain)和1个SET[Su(var)3-9,Enhancer-of-zeste,Trithorax]结构域的pGBKT7-PHD-SET重组质粒为"诱饵",采用酵母融合(yeast mating)方法筛选预转化的人脑cDNA文库.挑选阳性酵母菌落进行质粒提取、限制性内切酶分析和DNA测序.将测序结果在GenBank中进行核苷酸序列同源性比对,确定它们所对应的基因.通过再次酵母双杂交排除假阳性相互作用.结果:筛选cDNA文库共获得约600个阳性酵母菌落,随机挑选其中的65个菌落提取混合质粒.经过在氨苄青霉素培养盘中筛选,共得到43个文库pACT2-cDNA质粒.选取35个酶切片段不同的文库pACT2-cDNA质粒进行测序,测序结果比对揭示,35个cDNA插入片段来源于16种不同的基因.酵母双杂交证实其中RanBPM是ARA267-d的假阳性作用蛋白.结论:通过筛选cDNA文库发现ARA267-α可以与多个不同的蛋白质相互作用,这提示ARA267-α可能是一个具有多种生理功能的蛋白分子,而RanBPM极可能是一个转录因子.
|
| 关 键 词： | 受体,雄激素 酵母菌 杂交 基因文库 酵母双杂交 杂交筛选 雄激素受体 辅助调节因子 相互作用蛋白 associated androgen proteins Identification system 转录因子 蛋白分子 发现 来源 插入片段 酶切片段 选取 培养 氨苄青霉素 混合质粒 |
| 文章编号： | 1671-167X(2004)05-0514-05 |
| 修稿时间： | 2004-04-28 |
Identification of proteins interacting with androgen receptor- associated coregulator 267-α(ARA267-α) with the yeast two-hybrid system |
| |
| Xin Wang,Tie-jun Mai,Yi-nong Niu,Jian-wei Wang,Ying-lu Guo. Identification of proteins interacting with androgen receptor- associated coregulator 267-α(ARA267-α) with the yeast two-hybrid system[J]. Journal of Peking University. Health sciences, 2004, 36(5): 514-518 |
| |
| Authors: | Xin Wang Tie-jun Mai Yi-nong Niu Jian-wei Wang Ying-lu Guo |
| |
| Affiliation: | Department of General Surgery, Peking University First Hospital, Beijing 100034, China. wangxin_guo@hotmail.com |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Receptors androgen Yeasts Hybridization Gene library |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
