| 幽门螺杆菌空泡毒素活性的体外观察 |
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| 引用本文： | 杜奕奇,李兆申,苏暾,屠振兴,龚燕芳.幽门螺杆菌空泡毒素活性的体外观察[J].上海医学,2005,28(10):858-861,F0002. |
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| 作者姓名： | 杜奕奇 李兆申 苏暾 屠振兴 龚燕芳 |
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| 作者单位： | 200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化内科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化内科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化内科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化内科;200433,上海,第二军医大学附属长海医院消化内科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（30170427） |
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| 摘 要： | 目的研究幽门螺杆菌(Hp)液体浓缩上清液对胃上皮细胞的空泡毒性作用,为进一步开展空泡变性细胞毒素(VacA)的纯化及探讨VacA的致病机制奠定基础。方法将Hp菌株液体培养上清液制成粗制VacA蛋白,粗制VacA经倍比稀释(1∶160～1∶2)后与胃癌SGC7901细胞共同孵育后观察胃癌细胞形态变化,同时观察1∶2及1∶5滴度组于0、2、4、8、16和24h时的空泡活性。采用中性红摄入法(NRU)评价空泡活性。结果1∶2及1∶5滴度组胃癌细胞于24h时空泡形成细胞达100%,空泡细胞比例随毒素滴度递减。孵育24h时粗制VacA产生空泡活性的最小剂量约为6μg,超过120μg可导致细胞死亡。当毒素滴度为1∶2时,孵育4h即产生明显空泡550nm光吸收值(A550)=0.43±0.06],至16h达最高吸收值(A550=0.71±0.03),至24h时因细胞大量死亡,A550反而下降至0.06±0.04,与空白对照组的差异无显著性(P>0.05)。1∶5毒素滴度的时间曲线较1∶2滴度更恰当反映出空泡活性随孵育时间变化的特性。结论Hp液体培养上清浓缩液对胃癌细胞具有明显的空泡毒性作用,VacA导致的空泡毒性具有明显的浓度及时间依赖性,且易受多种因素的影响,适当的浓度及孵育时间是VacA致病机制研究过程中的关键因素。
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 空泡毒素 中性红摄入 |
| 收稿时间： | 2005-03-10 |
| 修稿时间： | 2005-03-10 |
Observations onvacuolating toxin of Helicobacter pylori in vitro |
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| DU Yiqi,LI Zhaoshen,SU Tun,TU Zhenxing,GONG Yan fang.Observations onvacuolating toxin of Helicobacter pylori in vitro[J].Shanghai Medical Journal,2005,28(10):858-861,F0002. |
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| Authors: | DU Yiqi LI Zhaoshen SU Tun TU Zhenxing GONG Yan fang |
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| Institution: | DU Yiqi,LI Zhaoshen,SU Tun,TU Zhen-xing,GONG Yanfang. Departm ent of Gastroenterology,Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200433,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori VacA Neutral red uptake |
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