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RNA干涉α-1,3-半乳糖转移酶对猪内皮细胞免疫和生理功能的影响
引用本文:韩炜,李霄,王建锋,张卓超,李伟民,张勇,姜楠,窦科峰.RNA干涉α-1,3-半乳糖转移酶对猪内皮细胞免疫和生理功能的影响[J].中华器官移植杂志,2013,34(3).
作者姓名:韩炜  李霄  王建锋  张卓超  李伟民  张勇  姜楠  窦科峰
作者单位:第四军医大学西京医院肝胆胰脾外科,西安,710032
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)项目
摘    要:目的 通过RNA干涉沉默猪内皮细胞内α-1,3-半乳糖转移酶(α-1,3GT)基因,观察基因沉默对猪内皮细胞免疫和生理功能的影响.方法 提取原代猪主动脉内皮细胞,并通过SV40LT基因转染构建永生化猪主动脉内皮细胞系.用含猪α-1,3GT干涉基因的慢病毒载体转染细胞,并检测α-1,3GT和α-1,3-半乳糖抗原(α-1,3Gal)的表达情况.将转染后细胞与正常人血清共培养,建立异种移植免疫排斥反应的细胞模型并通过四甲基偶氮唑盐、流式细胞术、免疫组织化学及免疫荧光技术检测基因沉默对内皮细胞免疫和生理功能的影响.结果 永生化前后,细胞的免疫和生理功能无明显变化.RNA干涉后,永生化细胞表达α-1,3GT及α-1,3Gal明显减少.与人血清共培养后,转染组细胞增殖速度较高,凋亡率较低,与人免疫球蛋白IgM、IgG及人补体C3和C5b-9结合较对照组及错配组减少.结论 通过沉默α-1,3GT基因可降低猪内皮细胞与人免疫球蛋白、补体的结合程度.该基因沉默后的内皮细胞可作为异种移植急性排斥反应细胞模型和研究平台.

关 键 词:移植  异种  内皮细胞  RNA干扰  移植免疫学  抗体  补体

Immunological and physiological functions of porcine endothelial cells after RNA interference
Abstract:
Keywords:Transplantation  heterologous  Endothelial cells  RNA interference  Transplantation immunology  Antibodies  Complement
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