| 抗人整合素β3亚基单链抗体基因的构建及在大肠杆菌中表达 |
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| 引用本文： | 马艳春,朱明洁,张毅,胡晶莹,杨瑶琴,赵新泰. 抗人整合素β3亚基单链抗体基因的构建及在大肠杆菌中表达[J]. 肿瘤, 2006, 26(7): 623-627 |
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| 作者姓名： | 马艳春 朱明洁 张毅 胡晶莹 杨瑶琴 赵新泰 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学上海医学院,上海,200032;上海交通大学,上海市肿瘤研究所细胞与分子免疫学研究室,上海,200032
2. 上海交通大学,上海市肿瘤研究所细胞与分子免疫学研究室,上海,200032 |
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| 摘 要： | 目的:构建抗人整合素β3亚基单链抗体(ScFv)基因,在大肠杆菌中表达并获得具有活性的ScFv。方法:从分泌抗人整合素β3亚基单抗(mAb)的杂交瘤细胞4F12中提取总RNA,RTPCR扩增VH和VL基因,通过PCR在VH和VL基因间插入柔性连接子(Gly4Ser)3,并将其克隆至原核表达载体pQE中,获得含β3抗体基因的高效表达载体pQEβ3ScFv。将重组子转化大肠杆菌M15后诱导表达,并对表达产物进行纯化和凝胶柱上在位复性。结果:获得抗β3单抗的VH和VL基因,构建了pQEβ3ScFv,并在大肠杆菌中获得了表达,表达蛋白相对分子质量约为26×103,以包涵体形式存在,纯化和复性后,ELISA证实其具有良好的抗原结合活性。结论:成功构建、表达了抗人整合素β3亚基的ScFv基因,并获得了有活性的ScFv。
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| 关 键 词： | 抗肿瘤药 整合素αvβ3 抗体 基因表达 血管生成抑制药 |
| 文章编号： | 1000-7431（2006）07-0623-05 |
| 收稿时间： | 2006-01-14 |
| 修稿时间： | 2006-04-15 |
Construction of anti-human integrin β3 ScFv gene and its expression in E.coli |
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| MA Yan-chun,ZHU Ming-jie,ZHANG Yi,HU Jing-ying,YANG Yao-qin,ZHAO Xin-tai. Construction of anti-human integrin β3 ScFv gene and its expression in E.coli[J]. Tumor, 2006, 26(7): 623-627 |
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| Authors: | MA Yan-chun ZHU Ming-jie ZHANG Yi HU Jing-ying YANG Yao-qin ZHAO Xin-tai |
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