| 大鼠PAX2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及沉默效果 |
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| 引用本文： | 李里,吴玉斌. 大鼠PAX2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及沉默效果[J]. 中国老年学杂志, 2014, 0(8): 2158-2161 |
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| 作者姓名： | 李里 吴玉斌 |
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| 作者单位： | 辽宁医学院儿科 |
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| 基金项目： | 沈阳市科学技术计划项目(F10-205-1-29);辽宁医学院青年科技启动基金项目(F2011Z005) |
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| 摘 要： | 目的构建PAX2特异性shRNA干扰慢病毒载体并观察其对大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)中PAX2基因的沉默效果。方法采用PAX2基因RNAi靶点序列合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与pGCSIL-GFP载体连接产生shRNA慢病毒载体,经PCR筛选阳性克隆进行DNA测序鉴定。用脂质体转染法将质粒共转染293T细胞,将包装产生的慢病毒颗粒感染NRK52E细胞,RT-PCR、Western印迹检测PAX2 mRNA和蛋白的表达。结果 PCR与DNA测序证实合成的含PAX2 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确。经RNA干扰后的靶细胞PAX2 mRNA及蛋白表达水平明显降低。结论成功构建人PAX2基因RNA干扰慢病毒载体,为以PAX2基因为靶点的梗阻性肾病基因治疗研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | PAX2 慢病毒 RNA干扰 |
Construction of lentiviral vector of shRNA specific for rat PAX2 and the silencing effect |
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| LI Li;WU Yu-Bin. Construction of lentiviral vector of shRNA specific for rat PAX2 and the silencing effect[J]. Chinese Journal of Gerontology, 2014, 0(8): 2158-2161 |
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| Authors: | LI Li WU Yu-Bin |
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| Affiliation: | LI Li;WU Yu-Bin;Department of Pediatric,Liaoning Medical Collage; |
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| Keywords: | PAX2 慢病毒 RNA干扰 |
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