| 人破伤风免疫噬菌体抗体库的建立及鉴定 |
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| 引用本文： | 刘军莉,王群,张蘋,高尚先,孙汶生,张利宁.人破伤风免疫噬菌体抗体库的建立及鉴定[J].山东大学学报(医学版),2004,42(6):636-639. |
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| 作者姓名： | 刘军莉 王群 张蘋 高尚先 孙汶生 张利宁 |
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| 作者单位： | 1. 山东大学医学院免疫学研究所,山东,济南,250012
2. 中国药品生物制品检验所,北京,100050 |
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| 基金项目： | 国家科技部“863”重大专项资助项目(NO2002AA2Z3338)。 |
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| 摘 要： | 目的：建立人破伤风免疫噬菌体抗体库，筛选抗破伤风类毒素的抗体基因，并在大肠杆菌中表达可溶性Fab段。方法：从破伤风类毒素免疫志愿者中分离淋巴细胞，提取细胞总RNA，用一组人IgG Fab基因特异性引物，从合成的cDNA中经PCR扩增出抗体轻链(VL CL)和重链Fd(VH CHl)基因，分别经Xba Ⅰ／Sac Ⅰ和Spe Ⅰ／XhoⅠ酶切克隆入噬菌粒pComb3。用破伤风外毒素作为抗原进行筛选富集获得特异性抗破伤风类毒素的噬菌体抗体，切去噬菌体外壳蛋白基因Ⅲ(gⅢ)，表达可溶性人抗破伤风类毒素的Fab段。结果：经核苷酸序列分析证实，所获得的基因为人IgGFab基因；用ELISA鉴定表明，表达的人IgGFab抗体能特异性地与破伤风外毒素结合。结论：利用噬菌体抗体库技术筛选可得到与破伤风外毒素特异性结合的人抗破伤风类毒素基因工程抗体。
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| 关 键 词： | 破伤风类毒素 噬菌体 免疫球蛋白类，Fab 抗体，细菌 |
| 文章编号： | 1671-7554(2004)06-0636-04 |
| 修稿时间： | 2004年5月24日 |
Construction and identification of human tetanus immune phage antibody library |
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| LIU Jun-li,WANG Qun,ZHANG Ping,et al.Construction and identification of human tetanus immune phage antibody library[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2004,42(6):636-639. |
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| Authors: | LIU Jun-li WANG Qun ZHANG Ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tetanus toxoid Bacteriophage Immunoglobulins Fab Antibodies bactexial |
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