半固体凝胶介质诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化

目的利用半固体凝胶介质诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化,确立一种基于物理特性的心肌细胞诱导分化方法。方法原代分离培养和鉴定BMSCs。以DMEM培养基和低熔点琼脂糖按不同配比配制成6.4%、3.2%、1.6%、0.8%、0.4%和0.2%6种物理密度基质,将BMSCs培养于上述基质。RT-PCR方法检测细胞分化标记基因心肌特异性基因肌球蛋白重链α(α-MHC)和抗小鼠心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)的mRNA水平;细胞免疫荧光方法检测cTnT和α-MHC的蛋白质表达情况。结果 RT-PCR结果显示BMSCs中cTnT mRNA表达峰值出现在物理密度为1.6%的培养基质中,而α-MHC的峰值出现在物理密度为3.2%的培养基质中。细胞免疫荧光结果显示BMSCs在不同密度基质中培养时表达cTnT和α-MHC的总体趋势与RT-PCR结果一致。结论利用半固体凝胶介质可实现将BMSCs向心肌细胞诱导分化。