| 淋病奈瑟菌外膜蛋白PIA基因原核表达系统的构建及序列分析 |
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| 引用本文： | 李召东,潘亚平,沈琳,张永华.淋病奈瑟菌外膜蛋白PIA基因原核表达系统的构建及序列分析[J].中国卫生检验杂志,2006,16(5):528-530. |
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| 作者姓名： | 李召东 潘亚平 沈琳 张永华 |
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| 作者单位： | 1. 杭州市红十字会医院,杭州,310005
2. 杭州市第三人民医院,杭州,310003 |
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| 摘 要： | 目的：分析比较5株临床分离的淋病奈瑟菌外膜蛋白PIA基因核苷酸及氨基酸序列，构建PIA基因的原核表达系统。方法：采用高保真PCR扩增5株淋病奈瑟菌全长PIA基因序列，T—A克隆后测序并与已发表的序列进行比较，用Wonderful分子生物学软件分析基因和蛋白质序列的相似性。再构建PIA原核表达系统，不同浓度IPTG诱导后，10％SDS—PAGE检测蛋白表达情况。结果：5株PIA淋病奈瑟菌均为IA6血清型。与报道的PIA基因序列（No：L19962）比较，核苷酸和氨基酸序列相似性均分别高达99．47％-100％和99．04％-100％。构建的原核表达系统pET42-PIA—Ecoli BL21DE3表达的重组蛋白PIA量占细菌总蛋白量的49．6％。结论：IA6为PIA菌株优势血清型，核苷酸和氨基酸序列相似性高，已成功构建淋病奈瑟菌PIA基因高效原核表达系统，为淋病奈瑟菌基因疫苗和临床检测试剂盒的研制打下基础。
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| 关 键 词： | 淋病奈瑟球菌 主要外膜蛋白PIA 序列分析 克隆/表达 |
| 文章编号： | 1004-8685（2006）05-0528-03 |
| 收稿时间： | 2006-01-11 |
| 修稿时间： | 2006年1月11日 |
Sequence analysis of outer membrane porin A genotypes of neisseria gonorrhoeae isolates and construction of prokaryotic expression system of porin A gene |
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| Li Zhao-dong,Pan Ya-ping,Shen Lin,Zhang Yong-hua.Sequence analysis of outer membrane porin A genotypes of neisseria gonorrhoeae isolates and construction of prokaryotic expression system of porin A gene[J].Chinses Journal of Health Laboratory Technology,2006,16(5):528-530. |
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| Authors: | Li Zhao-dong Pan Ya-ping Shen Lin Zhang Yong-hua |
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| Institution: | 1. Hangzhou Red Cross Hospital, Hangzhou 310005, China; 2. Hangzhou Third Hospital, Hangzhou 310003, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Neisseria gonorrhoeae Outer membrane porin A Sequence analysis Cloning/expression |
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