低氧对HTR-8/SVneo细胞增殖及HIF-1α、VEGF、MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的 采用二氯化钴（CoCl2）模拟体外低氧环境，探讨低氧状态对滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞增殖及缺 氧诱导因子（HIF）-1α、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP）-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子 1 （TIMP-1）蛋白表达的影响。方法 采用0、50、100、200、400、800、1 000、1 200 μmol/L的CoCl2处理HTR-8/SVneo细 胞，建立化学缺氧模型，CCK8法检测以上浓度培养24 h、48 h后对HTR-8/SVneo细胞增殖的影响；根据CCK8实验结 果拟定 CoCl2低、中、高浓度组，Western blot 检测 CoCl2低、中、高浓度组作用 48 h 对 HTR-8/SVneo 细胞中 HIF-1α、 VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响。结果 CCK8实验提示低氧状态激活HTR-8/SVneo细胞增殖，CoCl2作用于 HTR-8/SVneo细胞48 h后，OD值随浓度增加而上升；同一CoCl2浓度作用下，作用48 h较作用24 h的OD值均上升。 选择100、200、400 μmol/L的CoCl2作为CoCl2低、中、高浓度组。与空白组对比，CoCl2低、中、高浓度组HTR-8/SVneo 细胞中HIF-1α、MMP-9蛋白表达水平上调（P＜0.05），MMP-9/TIMP-1比例上升，呈浓度依赖性（P＜0.05），CoCl2中、 高浓度组的VEGF的蛋白表达水平上调（P＜0.05），CoCl2低、中、高浓度组的TIMP-1蛋白表达水平下降，但随CoCl2浓 度增加而呈上升趋势。结论 低氧状态可增强 HTR-8/SVneo 细胞的增殖能力，并可能通过 HIF-1α 的介导上调 VEGF的表达与MMP-9/TIMP-1比值。