miR-125在甲状腺癌组织中的表达及通过靶向负调控RAB11A促进甲状腺癌细胞活性的研究

目的:探讨miR-125在甲状腺癌组织中的表达及促进甲状腺癌细胞增殖的相关机制。方法:采用RT-PCR法检测26例甲状腺乳头状癌（PTC）标本和4株PTC细胞株中miR-125的表达水平。采用CCK-8法、细胞集落形成实验、Transwell实验以及流式细胞法验证miR-125在PTC细胞中的作用。采用双荧光素酶实验验证RAB11A是否是miR-125的直接靶点。结果:miR-125在甲状腺癌组织中的相对表达水平显著高于癌旁正常组织（P＜0.05）；与Nthy-Ori3-1相比，甲状腺癌细胞株TPC-1、NPA、KTC-1、WRO中的miR-125表达水平显著升高（P＜0.05）。与miRNA NC组相比，miR-125 mimics组的细胞克隆形成数量及侵袭细胞数量明显增多，miR-125 inhibitor组显著减少（P＜0.05）。Transwell实验结果显示，miRNA NC组细胞的迁移速度明显比miR-125 mimics组慢，但显著快于miR-125 inhibitor组。流式细胞检测显示，miRNA NC组、miR-125 mimics组、miR-125 inhibitor组的凋亡细胞比例分别为（5.1±0.08）%、（1.5±0.06）%、（7.8±0.07）%，两两比较后发现，miR-125 mimics组凋亡细胞比例最低，miR-125 inhibitor组最高。荧光素酶报告显示，RAB11A是miR-125的直接靶点。将miR-125模拟物、抑制剂或miRNA NC(100 nmol/L)转染KTC-1细胞后，RAB11A mRNA水平均无明显改变。但Western blot检测显示，与对照组相比，miR-125 mimics组RAB11A蛋白表达显著降低，miR-125 inhibitor组RAB11A蛋白表达显著增加。表明miR-125不影响RAB11A mRNA的稳定性，但在转录后水平调节RAB11A蛋白的表达。结论:miR-125通过在转录后水平负调控RAB11A蛋白的表达而发挥促甲状腺癌的作用。miR-125有望成为PTC患者诊断和治疗的新靶点。

Expression of miR-125 in thyroid carcinoma and its effect on the activity of thyroid cancer cells by targeting RAB11A