细胞因子信号传导抑制蛋白1抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白1的表达

目的 探讨细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)对高糖状态下肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）表达的影响。 方法 体外培养人肾小球系膜细胞，应用脂质体2000分别转染pCR3.1-SOCS-1表达质粒和pCR3.1 空质粒载体，G418筛选阳性克隆。分别采用低糖（5.5 mmol/L）、高糖（30 mmol/L）、低糖+甘露醇（24.5 mmol/L甘露醇）和JAK-STAT信号通路抑制剂AG490 （10 μmol/L）进行刺激。Western印迹检测系膜细胞SOCS-1、信号转导和转录活化因子1、3（STAT1、STAT3）及其磷酸化蛋白（p-STAT1、p-STAT3）的表达。ELISA法和放免法测定细胞上清液中MCP-1、FN和Ⅳ型胶原的含量。RT-PCR法检测SOCS-1和MCP-1 mRNA的表达。 结果 高糖刺激系膜细胞SOCS-1蛋白和mRNA表达呈时间依赖性变化， 4 h表达达到峰值，然后逐渐减低，24 h达基线水平。与低糖组相比，高糖组系膜细胞STAT1和STAT3磷酸化水平显著上调（P < 0.01）； MCP-1 mRNA水平表达显著上调（0.39±0.05）比（0.16±0.02），P < 0.01]；上清液中MCP-1（459±67）比（241±19） ng/L]、FN（5.84±0.61）比（3.41±0.31） mg/L]和Ⅳ型胶原（16.45±2.30）比（9.56±1.52） μg/L] 含量均显著增加（均P < 0.01）。与空载体对照组相比，SOCS-1过表达组系膜细胞STAT1和STAT3的磷酸化水平显著下降（P < 0.05）；MCP-1 mRNA表达下调（0.34±0.04）比（0.42±0.05），P < 0.05]； 上清液中MCP-1(387±47）比（463±56） ng/L]、 FN（4.61±0.57）比（5.76±0.74） mg/L]和Ⅳ型胶原(13.4±2.32)比（17.1±2.57） μg/L] 含量显著减少（均P < 0.05）。与高糖组相比，AG490组系膜细胞MCP-1 mRNA（0.31±0.04）表达显著下调；上清液中MCP-1（361±53） ng/L]、FN（5.46±0.71）mg/L]和Ⅳ型胶原（15.2±1.97） μg/L]含量均减少。 结论 SOCS-1过表达抑制高糖状态下肾小球系膜细胞MCP-1及细胞外基质的分泌可能部分是通过影响STAT1和STAT3的激活而实现。

Suppressor of cytokine signaling-1 inhibits high glucose-induced expression of monocyte chemoattractant protein-1 in glomerular mesangial cells