河流弧菌核酸检测试剂国家参考品的建立

目的 建立河流弧菌核酸检测试剂国家参考品并制定质量标准。方法 收集并筛选河流弧菌核酸阳性和阴性临床分离株样本，建立河流弧菌核酸检测试剂国家参考品。使用不同试剂对参考品进行协作标定，并对参考品稳定性和均匀性进行考核。结果 河流弧菌核酸检测试剂国家参考品由20份样本组成，包括8份阳性参考品P1～P8、10份阴性参考品N1～N10、1份检测限参考品L和1份重复性参考品R,L经菌落计数法测定浓度为1×108CFU/mL。国家参考品的质量标准为阳性符合率8/8，阴性符合率10/10，检测限要求1∶104稀释或更高浓度时应均为河流弧菌阳性，重复性要求对稀释后的两个浓度水平的Ct值的变异系数（CV，%）均不大于5.0%。经过随机抽样检测，参考品均匀性符合要求，在2～8℃冷藏条件、室温放置7天均未影响参考品稳定性。结论 本研究研制了河流弧菌核酸检测试剂国家参考品，并制定了其质量标准，可用于相关定性检测试剂的质量评价。