血管内皮生长因子对脂多糖诱导的巨噬细胞极化和破骨细胞分化的影响 |
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作者姓名: | 李博文 郭春 吴大鹏 韩博闻 李阳阳 杨锐娟 梁秋冬 |
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作者单位: | 1. 新乡医学院;2. 新乡医学院第一附属医院骨外科 |
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摘 要: | 目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)对在脂多糖(LPS)诱导下的RAW264.7巨噬细胞表型极化水平及破骨细胞分化的影响。方法 将处于对数生长期的RAW264.7细胞分为3组,培养周期为4 d, Control组为正常培养的RAW264.7细胞;LPS组为细胞接种贴壁后每次换液同时加入100 ng/mL LPS;LPS+VEGF组加LPS的方法与LPS组相同,第4天换液时加入1μg/mL VEGF。梯度密度培养RAW264.7细胞行甲苯胺蓝染色明确适宜种植密度;显微镜观察各组细胞形态变化;Western blot法检测各组白细胞介素(IL)-12、IL-10、精氨酸-1(Arg-1)蛋白表达水平;流式细胞术荧光标记测定各组巨噬细胞极化水平;抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测各组破骨细胞分化水平。结果 甲苯胺蓝染色明确细胞种植密度为2.5×103/cm2。显微镜下观察LPS组出现大量M1型巨噬细胞,LPS+VEGF组出现少量M2型巨噬细胞。LPS+VEGF组IL-12蛋白表达量低于LPS组(P<0.05),IL-10和Arg-1蛋白表达量显著高...
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关 键 词: | 血管内皮生长因子 脂多糖 RAW264.7 破骨细胞 巨噬细胞极化 |
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