曲霉生物膜对常用抗真菌药物的敏感性测定及其耐药的分子机制初探北大核心CSCD

目的探讨曲霉生物膜对常用抗真菌药物的敏感性及其耐药的分子机制。方法利用微量液基稀释法测定22株曲霉游离孢子对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性；同时建立22株曲霉生物膜的体外模型，用抗真菌药物敏感试验联合甲基四氮盐（x1Tr）减低法来评价曲霉生物膜对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性。通过实时RT—PCR测定烟曲霉生物膜形成过程中药物外排泵基因及唑类药物靶酶基因的相对表达量。结果对于曲霉的游离孢子，两性霉素B的最低抑菌浓度（MIC）范围是0．5～2mg／L，卡泊芬净的最低有效浓度（MEC）范围是0．125—0．25mg／L，伏立康唑的MIC范围是0．5—1mg／L；对于曲霉生物膜，两性霉素B的SMIC。（抑制50％固着性曲霉生物膜生长的最小药物浓度）和SMIC。（抑制80％固着性曲霉生物膜生长的最小药物浓度）范围分别是2～〉32mg／L和8～〉32mg／L，卡泊芬净的SMIC∞和SMIC8D范围分别是32～〉256mg／L和256～〉256mg／L，伏立康唑的SMIC∞和SMIC。范围分别是4～〉256mg／L和32～〉256mg／L。烟曲霉生物膜形成过程中药物外排泵基因及唑类药物靶酶基因相对表达量测定显示，与0h相比，7个待测基因在4h时表达量没有变化；8h时AfuMDR1、CYP51A、CYP51B表达量升高，CYP51A表达量升高最明显；12、16、24h时MuMDR1、AfuMDR2、AfuMDR4、CYP51A、CYP51B表达量升高，其中CYP51A表达量升高的最明显；AfuMDR3和atrF在生物膜形成过程中表达量没有明显变化。结论与游离孢子相比，曲霉生物膜对两性霉素B、卡泊芬净和伏立康唑的敏感性明显下降；烟曲霉形成生物膜以后，药物外排泵基因和唑类靶酶基因的表达量升高。