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HPV16L1E7的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达
引用本文:卢翌,卞继峰,于修平,耿昭,胡海燕,刘师莲,刘传华,王晓明,王伟. HPV16L1E7的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达[J]. 山东大学学报(医学版), 2003, 41(2): 112-115
作者姓名:卢翌  卞继峰  于修平  耿昭  胡海燕  刘师莲  刘传华  王晓明  王伟
作者单位:山东大学医学院医学分子生物学实验中心;山东大学医学院医学分子生物学实验中心;山东大学医学院医学分子生物学实验中心;山东大学医学院医学分子生物学实验中心;山东大学医学院医学分子生物学实验中心;山东大学医学院医学分子生物学实验中心;山东大学医学院医学分子生物学实验中心;山东大学医学院医学分子生物学实验中心;山东大学医学院医学分子生物学实验中心
基金项目:国家自然科学基金(39870739),山东省卫生厅科研基金,山东大学青年基金资助课题
摘    要:目的:研究人乳头瘤病毒(HPV)的主要衣壳蛋白L1和主要的转化蛋白E7的融合基因在原核细胞中的表达,为研制HPVl6L1E7疫苗和诊断试剂盒提供依据。方法:采用聚合酶链反应(PCR)以重组质粒pUCl9UE7为模板扩增HPVl6L1E7基因片段,克隆至载体pMDl8-T中,并用限制性内切酶将HPVl6L1E7基因切下,克隆至原核表达质粒pQE30中,经IPTG诱导表达,再使用SDS-PAGE和蛋白印迹检测其抗原性和表达水平。结果:HPVl6L1E7融合蛋白能被抗HPVl6L1抗体识别,分子量为66KD,经IPTG诱导4h后,表达的HPVl6L1E7融合蛋白占菌体总蛋白量的25%以上。结论:成功构建的表达载体pOE30-L1E7可在原核表达细胞中高效表达,且表达出的HPVl6L1E7融合蛋白具有反应活性,可与HPVl6抗体发生反应。

关 键 词:乳头状瘤病毒    克隆  分子  大肠杆菌  基因表达
文章编号:1671-7554(2003)02-0112-04
修稿时间:2002-07-04

Cloning and expression of human papillomavirus type 16 L1E7 in E.coli
LU Yi,BIAN Ji-feng,YU Xiu-ping,et al. Cloning and expression of human papillomavirus type 16 L1E7 in E.coli[J]. Journal of Shandong University:Health Sciences, 2003, 41(2): 112-115
Authors:LU Yi  BIAN Ji-feng  YU Xiu-ping  et al
Abstract:
Keywords:Papillomavirus  human  Clone  molecular  Escherichia coli  Gene expression  
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