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重组人CD40 L功能性片段在CHO细胞中的表达
引用本文:陈华,蒋玉辉,曹开源,吴梧桐. 重组人CD40 L功能性片段在CHO细胞中的表达[J]. 药物生物技术, 2008, 15(2): 115-117
作者姓名:陈华  蒋玉辉  曹开源  吴梧桐
作者单位:1. 中国药科大学生命科学与技术学院,江苏,南京,210009;广东省药品检验所,广东,广州,510180
2. 广东省药品检验所,广东,广州,510180
3. 中山大学免疫学教研室,广东,广州,510089
4. 中国药科大学生命科学与技术学院,江苏,南京,210009
摘    要:克隆人CD40 L基因功能性片段(E107-L261),并在CHO细胞中进行表达.从健康人扁桃体组织中提取总RNA,通过RT-PCR技术,扩增CD40 L胞外区cDNA功能性片段,经DNA测序证实后,将得到的片段基因插入pcDNA3.0表达载体,构建了pcDNA3.0-hCD40 L真核表达载体.将重组质粒pcDNA3.0-hCD40 L转染CHO细胞,经G418筛选出阳性细胞克隆,扩大培养,提取细胞总蛋白,用SDS-PAGE分离并western blot-ting鉴定其特异性,通过小鼠脾淋巴细胞增值实验检验其生物学活性.结果,CD40 L胞外区功能性片段(E107-L261)cDNA被正确克隆到真核表达载体pcDNA3.0中并在CHO中成功表达,具有免疫学和生物学活性.结论:真核表达载体peDNA3.0-CD40 L的成功构建并在CH0中成功表达.

关 键 词:CD40配体  CHO细胞  表达  生物活性  重组人  功能性  细胞增值  真核表达载体  CHO Cells  Gene  Human  Fragment  Functional  Recombinant  其生物学活性  免疫学  细胞克隆  结果  实验检验  淋巴  小鼠  western  分离  细胞总蛋白
文章编号:1005-8915(2008)02-0115-03
修稿时间:2007-09-23

Expression of Recombinant Functional Fragment of Human CD40 L Gene in CHO Cells
CHEN Hua,JIANG Yu-hui,CAO Kai-yuan,WU Wu-tong. Expression of Recombinant Functional Fragment of Human CD40 L Gene in CHO Cells[J]. Pharmaceutical Biotechnology, 2008, 15(2): 115-117
Authors:CHEN Hua  JIANG Yu-hui  CAO Kai-yuan  WU Wu-tong
Abstract:
Keywords:
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