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| 重组人CD40 L功能性片段在CHO细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 陈华,蒋玉辉,曹开源,吴梧桐.重组人CD40 L功能性片段在CHO细胞中的表达[J].药物生物技术,2008,15(2):115-117. |
| 作者姓名： | 陈华 蒋玉辉 曹开源 吴梧桐 |
| 作者单位： | 1. 中国药科大学生命科学与技术学院,江苏,南京,210009;广东省药品检验所,广东,广州,510180 2. 广东省药品检验所,广东,广州,510180 3. 中山大学免疫学教研室,广东,广州,510089 4. 中国药科大学生命科学与技术学院,江苏,南京,210009 |
| 摘 要： | 克隆人CD40 L基因功能性片段(E107-L261),并在CHO细胞中进行表达.从健康人扁桃体组织中提取总RNA,通过RT-PCR技术,扩增CD40 L胞外区cDNA功能性片段,经DNA测序证实后,将得到的片段基因插入pcDNA3.0表达载体,构建了pcDNA3.0-hCD40 L真核表达载体.将重组质粒pcDNA3.0-hCD40 L转染CHO细胞,经G418筛选出阳性细胞克隆,扩大培养,提取细胞总蛋白,用SDS-PAGE分离并western blot-ting鉴定其特异性,通过小鼠脾淋巴细胞增值实验检验其生物学活性.结果,CD40 L胞外区功能性片段(E107-L261)cDNA被正确克隆到真核表达载体pcDNA3.0中并在CHO中成功表达,具有免疫学和生物学活性.结论:真核表达载体peDNA3.0-CD40 L的成功构建并在CH0中成功表达. |
| 关 键 词： | CD40配体 CHO细胞 表达 生物活性 重组人 功能性 细胞增值 真核表达载体 CHO Cells Gene Human Fragment Functional Recombinant 其生物学活性 免疫学 细胞克隆 结果 实验检验 淋巴 小鼠 western 分离 细胞总蛋白 |
| 文章编号： | 1005-8915(2008)02-0115-03 |
| 修稿时间： | 2007年9月23日 |
Expression of Recombinant Functional Fragment of Human CD40 L Gene in CHO Cells |
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| CHEN Hua,JIANG Yu-hui,CAO Kai-yuan,WU Wu-tong.Expression of Recombinant Functional Fragment of Human CD40 L Gene in CHO Cells[J].Pharmaceutical Biotechnology,2008,15(2):115-117. | |
| Authors: | CHEN Hua JIANG Yu-hui CAO Kai-yuan WU Wu-tong |
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