| 幽门螺杆菌hpaA真核表达质粒的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 曾韦锟,邹全明,井申荣.幽门螺杆菌hpaA真核表达质粒的构建及鉴定[J].第三军医大学学报,2005,27(6):547-549. |
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| 作者姓名： | 曾韦锟 邹全明 井申荣 |
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| 作者单位： | 第三军医大学,新桥医院检验科,重庆,400037;第三军医大学,医学检验系临床生物医药中试研究基地,微生物学及免疫学教研室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划资助项目(2001AA215161)~~ |
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| 摘 要： | 目的 克隆幽门螺杆菌hpaA基因,并构建其真核表达质粒。方法 以HpNCTC11637基因组DNA为模板, PCR扩增hpaA基因,亚克隆至pMD18 T载体中,目的基因经酶切纯化后插入pTCAE,转化E.coliDH5α,酶切并测序鉴定正 确的重组质粒命名为pT hpaA。电穿孔法将pT hpaA转染CHO细胞,Westernblot检测HpaA蛋白的表达。结果 克隆重组 得到pT hpaA,将pT hpaA电穿孔法转染CHO后,培养上清经Westernblot检测,在相对分子量为30000条带处出现特异性抗 原抗体反应。结论 成功构建了幽门螺杆菌hpaA真核表达质粒,体外CHO细胞转染和Westernblot实验证实了HpaA蛋 白的表达,为进一步的免疫实验奠定了基础。
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| 关 键 词： | Helicobacter pylori hpaA DNA疫苗 |
| 文章编号： | 1000-5404(2005)06-0547-03 |
| 修稿时间： | 2005年1月8日 |
Construction and identification of eukaryotic expression plasmid of hpaA of H.pylori |
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| ZENG Wei-kun,ZOU Quan-ming,JING Shen-rong.Construction and identification of eukaryotic expression plasmid of hpaA of H.pylori[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2005,27(6):547-549. |
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| Authors: | ZENG Wei-kun ZOU Quan-ming JING Shen-rong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori hpaA DNA vaccine |
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