| 一种重组口蹄疫疫苗的原核表达、纯化及其活性检测 |
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| 引用本文： | 董博翰,王华,胡小平,房明丽,张永胜,张培因,王丽颖.一种重组口蹄疫疫苗的原核表达、纯化及其活性检测[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(2). |
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| 作者姓名： | 董博翰 王华 胡小平 房明丽 张永胜 张培因 王丽颖 |
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| 作者单位： | 吉林大学白求恩医学院分子生物学教研室,吉林,长春,130021 |
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| 基金项目： | 吉林省科技厅资助课题 |
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| 摘 要： | 目的:利用原核表达系统诱导表达一种可以作为口蹄疫疫苗的重组蛋白J11-G,并对这种蛋白进行纯化以及活性检测.方法:对已经构建的表达载体PET28a-J11-G进行酶切鉴定,将鉴定后的重组载体PET28a-J11-G转化入大肠杆菌BL21,在BL21细菌细胞中诱导表达月的蛋白,用改良的镍亲和层析法纯化目的蛋白,以EIJSA检测纯化所得蛋白的活性.结果:长期冻存的重组载体PET28a-J11-G结构完整,其在大肠杆菌BL21中经1 mmol/L IPTG诱导后表达出相对分子质量(Mr)约为47 000的目的蛋白,经纯化后获得了产率和纯度均很高的重组蛋白J11-G,ELISA检测证明该蛋白活性良好.结论:成功地对重组蛋白J11-G进行了诱导表达,改良法有利于蛋白产率和纯度的提高,纯化蛋白具有较好的免疫活性.重组蛋白J11-G将可能成为一种抗口蹄疫疫苗.
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| 关 键 词： | 口蹄疫疫苗 重组蛋白 纯化 活性检测 |
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