EGFRvⅢ的siRNA对胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响 |
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作者姓名: | 张兴梅 石玉生 陈明 夏许可 李树基 李晓文 曹东林 |
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作者单位: | 1.510515 广州,南方医科大学基础医学院神经生物学教研室;2.南方医院放疗科;3.南方医科大学基因工程所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,广东省自然科学基金 |
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摘 要: | 目的研究EGFRvⅢ的siRNA对U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞中EGFRvⅢ的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响。 方法化学方法合成特异针对EGFRvⅢ的siRNA,转染U87-EGFRvⅢ细胞后,利用半定量RT-PCR法检测细胞中EGFRvⅢ的mRNA表达,采用蛋白印迹法和免疫荧光法检测细胞中EGFRvⅢ的蛋白表达水平,MTT法检测siRNA对胶质瘤细胞增殖的作用,Annexin V-FITC/PI法检测siRNA对细胞凋亡的作用。结果RT-PCR、蛋白印迹法和免疫荧光法均可显示EGFRvⅢ siRNA可使EGFRvⅢ的基因和蛋白表达显著下降,48 h内可使蛋白含量下降(757±31)%;MTT法和Annexin V-FITC/PI检测结果显示siRNA可抑制U87-EGFRvⅢ细胞的增殖并促进其凋亡。 结论EGFRvⅢ siRNA可特异地抑制EGFRvⅢ在胶质瘤细胞中的表达,抑制细胞增殖、促进细胞凋亡。
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关 键 词: | 表皮生长因子Ⅲ型突变体 RNA干扰 胶质瘤 U87 |
收稿时间: | 2010-08-26; |
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