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兔软骨细胞与骨髓基质细胞的平面共培养:两者培养比例筛选
引用本文:孙磊,綦惠,陈磊,陈海燕,江健,陶剑锋,杰永生,高新生,Peter I.Lelkes. 兔软骨细胞与骨髓基质细胞的平面共培养:两者培养比例筛选[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2010, 14(27). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.27.004
作者姓名:孙磊  綦惠  陈磊  陈海燕  江健  陶剑锋  杰永生  高新生  Peter I.Lelkes
作者单位:1. 北京市创伤骨科研究所,北京积水潭医院,北京市,100035
2. School of Biomedical Engineering,Drexel University,United States
基金项目:北京市科技新星计划项目 
摘    要:背景:骨髓基质细胞一定条件下可以分化为软骨细胞,但目前还缺少将软骨与骨髓基质细胞平面共培养的深入探讨.目的:拟明确骨髓基质细胞与软骨细胞共培养时比例的选择、细胞增殖活性、软骨特异性蛋白表达的规律,用于细胞移植的最佳时间和传代次数.方法:软骨细胞与骨髓基质细胞的分离培养,传代后分为5组:单纯软骨细胞组;共培养组,软骨细胞与骨髓基质细胞7:3,5:5,3:7组;以及单纯骨髓基质细胞组.传代至第4代(G4),倒置相差显微镜观察各组细胞在不同传代时期的细胞形态,MTT实验检测细胞增殖活性,甲苯胺蓝与阿利新蓝染色,细胞免疫化学法检测Ⅱ型胶原的表达.结果与结论:共培养各组在各个时期细胞表型正常.G1~G3代细胞增殖活跃,G4代细胞增殖能力下降.共培养各组甲苯胺蓝与阿利新蓝染色以及Ⅱ型胶原表达在G2和G3代均较高.综合各指标认为,以软骨细胞与骨髓基质细胞的比例为5:5,3:7组为最佳.软骨细胞与骨髓基质细胞平面共培养,保持了软骨细胞的形态和蛋白表达特性,如进行细胞移植,选取软骨细胞与骨髓基质细胞5:5或3:7的比例为最佳.

关 键 词:软骨细胞  骨髓基质细胞  共培养  蛋白聚糖  Ⅱ型胶原

Monolayer coculture of rabbit chondrocytes and bone marrow stromal cells: Screening of culture proportion
Sun Lei,Qi Hui,Chen Lei,Chen Hai-yan,Jiang Jian,Tao Jian-feng,Jie Yong-sheng,Gao Xin-sheng,Peter I.Lelkes. Monolayer coculture of rabbit chondrocytes and bone marrow stromal cells: Screening of culture proportion[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2010, 14(27). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.27.004
Authors:Sun Lei  Qi Hui  Chen Lei  Chen Hai-yan  Jiang Jian  Tao Jian-feng  Jie Yong-sheng  Gao Xin-sheng  Peter I.Lelkes
Abstract:
Keywords:
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