| OX40-IgG1融合基因重组表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 付苏,郭树忠,李立文,夏炜,易成刚,郝晓艳,刘蓓.OX40-IgG1融合基因重组表达载体的构建及鉴定[J].中国美容医学,2009,18(7):960-963. |
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| 作者姓名： | 付苏 郭树忠 李立文 夏炜 易成刚 郝晓艳 刘蓓 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院全军整形外科研究所,陕西西安,710032
2. 西北大学生命科学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建含人OX40-IgG1融合基因的真核表达载体pDC315-0X40Ig,表达具有生物学活性的OX40Ig融合蛋白,为诱导异体复合组织移植免疫耐受的基因治疗作准备.方法:全基因合成目的基因OX40Ig,即人0X40胞外段序列及人IgG1 Fc段序列,将该片段插入到pUC57(+)载体后,亚克隆至真核表达载体pDC315(+),构建pDC315-0X40Ig重组质粒.构建的重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定后,用脂质体法转染于NIH/3T3细胞.以SDS-PAGE与Western Blotting检测细胞培养上清中OX40Ig融合蛋白的表达情况;MTT法观察OX40Ig对混合淋巴细胞反应(MLR)的抑制作用.结果:合成的目的基因全长1320bp,构建的重组质粒经PCR,双酶切及测序鉴定正确.SDS-PAGE与Western Blotting证实OX40Ig融合蛋白在3T3细胞中实现表达,表达产物相对分子量为48000左右,与理论预期值相符.体外实验证实OX40Ig蛋白能够抑制异基因淋巴细胞的MLR.结论:成功构建了人OX40-IgG1融合基因真核表达载体pDC315-OX40Ig,体外实验证实表达的OX40Ig蛋白可抑制淋巴细胞增殖,为干预同种异体复合组织移植排斥反应奠定了基础.
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| 关 键 词： | 融合基因 真核表达栽体 |
Construction and identification of a recombinant expression vector encoding OX40-1gGI fusion gene |
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| FU Su,GUO Shu-zhong,LI Li-wen,XIA Wei,YI Cheng-gang,HAO Xiao-yan,LIU Bei.Construction and identification of a recombinant expression vector encoding OX40-1gGI fusion gene[J].Chinese Journal of Aesthetic Medicine,2009,18(7):960-963. |
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| Authors: | FU Su GUO Shu-zhong LI Li-wen XIA Wei YI Cheng-gang HAO Xiao-yan LIU Bei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | OX40-IgG1 |
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