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木犀草素显著降低hUC-MSCs衰老相关分泌表型
作者姓名:熊婕  李秋柏  吴基良  曹玉林  屈姣  余娅丽  王珊
作者单位:1. 湖北科技学院医学部药学院;2. 湖北科技学院附属第二医院;3. 华中科技大学同济医学院附属协和医院
基金项目:十四五国家重点研发计划专项项目(2021YFA1101500);;国家自然科学基金重大研究计划(92049119);;湖北省自然科学基金创新群体项目(2022CFA019);
摘    要:目的 探究木犀草素(LUT)能否逆转或延缓人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的复制性衰老进程。方法 分离获得原代hUC-MSCs(P0),连续传代培养至25代(P25),将其分为衰老模型组与木犀草素组(5μmol/L)。通过CCK8法检测细胞活率;流式细胞术比较细胞增殖周期、凋亡率的变化;通过显微镜观察细胞普通形态并采用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色比较细胞衰老程度;通过ELISA法检测细胞来源的上清中衰老相关分泌表型(SASP)的分泌情况;qRT-PCR检测细胞中衰老、成骨、成脂相关基因的表达。通过茜素红S和油红O染色,比较两组成骨、成脂分化能力的差异。结果 5μmol/L的LUT未明显影响细胞存活率与凋亡率;LUT组形态学呈“年轻化”改变,SA-β-gal染色阳性率明显减少。LUT可下调细胞衰老相关基因,降低SASP浓度,促进细胞增殖,上调细胞成骨相关基因,促进钙结节形成;下调细胞成脂相关基因,抑制脂滴形成。结论 LUT可以显著降低衰老细胞中衰老相关基因的表达与SASP的分泌,发挥促进衰老hUC-MSCs成骨分化、抑制成脂分化能力的作用。

关 键 词:间充质干细胞  木犀草素  抗衰  复制性衰老  衰老相关分泌表型
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