H1N1嵌合冷适应疫苗株的构建及其生物学特性分析与鉴定 |
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引用本文: | 李东旭,孙伟洋,赵梦琳,孙悦,朱梦涵,刘夏薇,苏日娜,武毓姝,任娟,罗敏,王铁成,冯娜,夏咸柱,高玉伟,闫芳.H1N1嵌合冷适应疫苗株的构建及其生物学特性分析与鉴定[J].中国病原生物学杂志,2023(5):497-501+507. |
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作者姓名: | 李东旭 孙伟洋 赵梦琳 孙悦 朱梦涵 刘夏薇 苏日娜 武毓姝 任娟 罗敏 王铁成 冯娜 夏咸柱 高玉伟 闫芳 |
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作者单位: | 1. 山西农业大学;2. 中国农业科学院长春兽医研究所;3. 东北师范大学;4. 河南大学;5. 吉林农业大学;6. 山东师范大学 |
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基金项目: | 国家科技重大专项(No.2020ZX10001-016); |
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摘 要: | 目的 应用反向遗传技术构建以B型流感病毒冷适应株为骨架表达季节性流感病毒H1N1 HA蛋白的嵌合疫苗株。方法 将B型流感病毒冷适应株B/Vienna/1/99的HA片段胞外区替换为H1N1(A/Victoria/2570/2019)的HA蛋白,将重组质粒与骨架株的其余7个质粒共转染293T细胞,拯救H1N1嵌合疫苗株。对重组病毒株进行血凝鉴定、RT-PCR鉴定、电镜鉴定、一步生长曲线绘制以及小鼠安全性评价。结果 成功拯救出H1N1嵌合流感病毒株,命名为rA/B-H1-Vic。经测序鉴定其序列与预期一致,并且在电镜下观察到流感病毒粒子的典型特征。H1N1嵌合流感病毒株血凝效价最高达25,在MDCK细胞上的病毒滴度为104.5 TCID50/mL,在鸡胚中的病毒滴度为108.36EID50/mL。分别以106 EID50和105 EID50剂量鼻腔接种小鼠,其体重与对照组相比无明显下降,小鼠存活...
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关 键 词: | H1N1嵌合疫苗株 HA 嵌合疫苗 反向遗传技术 |
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