| 基于昆虫细胞-杆状病毒表达系统的SARS-CoV-2 S1蛋白的高效表达 |
| |
| 引用本文： | 张如悦,高耀荣,王建超,曹磊,张艳敏,张炜坚,彭雯娟,谭文松,赵亮.基于昆虫细胞-杆状病毒表达系统的SARS-CoV-2 S1蛋白的高效表达[J].中国病原生物学杂志,2023(1):1-5+11. |
| |
| 作者姓名： | 张如悦 高耀荣 王建超 曹磊 张艳敏 张炜坚 彭雯娟 谭文松 赵亮 |
| |
| 作者单位： | 1. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;3. 上海倍谙基生物科技有限公司 |
| |
| 摘 要： | 目的 设计、构建表达新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2) S1蛋白的重组杆状病毒，建立并优化其在昆虫细胞中的生产工艺，为新型冠状病毒肺炎(COVID-19)血清学诊断方法的建立及疫苗开发奠定基础。方法 利用分子克隆技术将S1基因插入pFastBacTM 1质粒，获得重组质粒pFastBac-S1,经转座获得重组杆粒rbacmid-S1,转染Sf9细胞后包装获得重组杆状病毒rBV-S1,通过rBV-S1感染High FiveTM(Hi5)细胞表达S1蛋白，使用Western blot分析鉴定S1蛋白的表达。在此基础上，建立优化rBV-S1扩增和蛋白表达的工艺，以实现S1蛋白的高效表达。结果 通过特异性引物PCR扩增重组质粒pFastBac-S1与重组杆粒rbacmid-S1,获得大小分别为2 367 bp、4 370 bp的基因片段，表明S1基因成功克隆入pFastBacTM 1质粒与bacmid;采用Western blot分...
|
| 关 键 词： | 新型冠状病毒(SARS-CoV-2) 新型冠状病毒肺炎(COVID-19) S1蛋白 昆虫细胞-杆状病毒表达载体系统 |
|
|
