鲍曼不动杆菌噬菌体ZZ1受体结合蛋白gp37的克隆表达

目的 为进一步了解噬菌体与宿主菌之间的相互作用机制，对鲍曼不动杆菌噬菌体ZZ1受体结合蛋白gp37进行克隆表达。方法 原核表达噬菌体ZZ1重组受体结合蛋白gp37,从分子质量、抗原性以及对ZZ1吸附竞争干扰的功能等对表达的重组受体结合蛋白gp37进行鉴定。结果 PCR扩增ZZ1gp37基因后，成功诱导表达了含6×His标签的ZZ1重组受体结合蛋白gp37,SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量约为140×10³;使用0.5 mmol/L IPTG 16℃诱导过夜较37℃诱导4 h,蛋白可溶性表达增多；Western blot显示纯化蛋白可分别被his标签抗体和小鼠抗ZZ1多克隆抗体识别；竞争吸附试验显示，在重组ZZ1gp37蛋白存在的情况下，ZZ1对鲍曼不动杆菌AB09V的吸附效率与对照组的63.5%相比下降39.5%。结论 成功表达了噬菌体ZZ1的重组受体结合蛋白gp37,蛋白的分子质量、反应原性以及对ZZ1吸附的竞争干扰作用均符合预期，为噬菌体ZZ1与宿主菌相互作用机制研究奠定了基础。