藏红花素通过Nrf2/HO-1通路对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障的保护作用

目的] 探讨藏红花素对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障（BBB）的保护作用及其机制。方法] 按随机数字表法将240只健康SD大鼠分为假手术组，模型组，低（10 mg/kg）、中（20 mg/kg）、高（40 mg/kg）剂量藏红花素组和尼莫地平（2 mg/kg）组，每组40只；采用夹闭大脑中动脉2 h的方法复制脑缺血再灌注大鼠模型，各组分别于造模手术前7 d开始每日1次腹腔注射给药（假手术组和模型组均给予0.9%氯化钠溶液）。再灌注24 h后，进行神经功能缺失评分，红四氮唑（TTC）染色法计算脑组织梗死率，失质量法检测脑组织含水量；苏木精-伊红（HE）染色法观察脑组织病理学改变；伊文思蓝渗透法检测BBB通透性；酶联免疫吸附（ELISA）法检测脑组织肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、白细胞介素-1β （IL-1β）、干扰素-γ （IFN-γ）含量；分光光度法检测丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测脑组织闭合蛋白（Occludin）、闭锁连接蛋白-1（ZO-1）、核因子E2相关因子2 （Nrf2）、血红素加氧酶-1 （HO-1）、胞浆核因子-κB p65 （NF-κB p65）、胞核NF-κB p65蛋白表达。结果] 与假手术组比较，模型组大鼠神经功能缺失评分、脑梗死体积率、脑含水量均升高（P<0.05）；脑组织可见水肿，神经元数量减少、空泡变性，胞核偏移、固缩深染，炎性细胞浸润等病理学改变；脑组织伊文思蓝渗透量升高（P<0.05）；脑组织TNF-α、IL-1β、IFN-γ、MDA含量升高，SOD、CAT活性降低（P<0.05）；脑组织Occludin、ZO-1、Nrf2、HO-1表达量降低，胞浆NF-κB p65、胞核NF-κB p65表达量和胞核NF-κB p65/胞浆NF-κB p65比值升高（P<0.05）。与模型组比较，中、高剂量藏红花素组和尼莫地平组神经功能缺失评分、脑梗死体积率、脑含水量降低（P<0.05）；脑组织病理学改变明显改善，伊文思蓝渗透量（P<0.05）；TNF-α、IL-1β、IFN-γ、MDA含量降低且SOD、CAT活性升高（P<0.05）；Oc－cludin、ZO-1、Nrf2、HO-1表达量升高，胞浆NF-κB p65、胞核NF-κB p65表达量和胞核NF-κB p65/胞浆NF-κB p65比值降低（P<0.05）。结论] 藏红花素对脑缺血再灌注大鼠BBB结构和通透性具有一定的保护作用，能够减轻脑组织损伤，其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路，抑制NF-κB入核，进而抑制氧化应激和炎症反应有关。

Protective effect of crocin on the blood-brain barrier of rat with cerebral ischemia reperfusion through Nrf2/HO-1 pathway