| 人胰岛素瘤相关蛋白-2基因的克隆及原核表达研究 |
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| 引用本文： | 贾秀娟,陈战,许光武,谢超,谢晓雁,罗敏.人胰岛素瘤相关蛋白-2基因的克隆及原核表达研究[J].上海交通大学学报(医学版),2003,23(3). |
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| 作者姓名： | 贾秀娟 陈战 许光武 谢超 谢晓雁 罗敏 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学瑞金医院上海市内分泌研究所,上海200025 |
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| 基金项目： | 上海市卫生局资助项目，上海市高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的克隆1型糖尿病自身抗原人胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)的编码基因,并从大肠杆菌中表达具有免疫原性的人IA-2重组蛋白.方法抽提胎脑总RNA,通过RT-PCR获得编码IA-2胞内结构域的cDNA,与Pinpoint Xa-1T质粒相连接,构建表达型重组质粒,经转化、筛选并鉴定后,从大肠杆菌诱导表达生物素酰化融合蛋白,进而用亲和层析纯化之,以dot-blot鉴定其免疫原性.结果重组质粒转化的大肠杆菌经IPTG诱导表达及亲和层析后得到了纯度较高、分子量约为59kd的融合蛋白,表达产物用dot-blot证明具有免疫原性.结论原核表达的生物素酰化人IA-2胞内段融合蛋白具有正确的免疫学构象.
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| 关 键 词： | 1型糖尿病 胰岛素瘤相关蛋白-2 自身抗原 自身抗体 |
Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Human Insulinnoma Associated Protein-2 Gene |
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