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重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体的构建及转染兔骨髓基质干细胞的实验研究
引用本文:薛震,吕松岑,赵金东,田坤. 重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体的构建及转染兔骨髓基质干细胞的实验研究[J]. 中国矫形外科杂志, 2007, 15(20): 1570-1573
作者姓名:薛震  吕松岑  赵金东  田坤
作者单位:哈尔滨医科大学附属第二医院骨二科,哈尔滨,150086
基金项目:黑龙江省留学回国人员科技活动基金
摘    要:[目的]构建人骨形态发生蛋白-7(human bone morphogenetic protein-7,hBMP-7)基因真核表达载体,评价其转染兔骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的诱导成骨能力。[方法]从人类胎盘组织中克隆出hBMP-7基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,成功构建了重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体;从兔骨髓中分离培养BMSCs,分为3组:ApcDNA3,1-hBMP-7转染组;B空载体pcDNA3.1转染组;C未转染组。使用RT-PCR、免疫组织化学等方法检测hBMP-7在BMSCs中的表达。检测各组细胞碱性磷酸酶,胶原,骨钙蛋白合成情况。[结果]RT.PCR、免疫组织化学检测显示经hBMP-7转染的BMSCs中有BMP-7表达。经hBMP-7转染BMSCs的碱性磷酸酶于转染后第2d显著增高,到第8d达到最高;经hBMP-7转染的BMSCs合成胶原、骨钙蛋白能力也显著提高,与转染空载体、未转染的BMSCs相比有显著性差异(P〈0.05)。[结论]成功构建了pcDNA3,1-hBMP-7真核表达载体;外源的hBMP-7基因可在兔BMSCs中充分、高效的表达,并且这种外源性hBMP-7基因具备了促进兔骨髓基质干细胞向成骨细胞转化的能力,这为hBMP-7的基因治疗提供了坚实的理论基础。

关 键 词:人骨形态发生蛋白-7  基因转染  骨髓基质干细胞
文章编号:1005-8478(2007)20-1570-04
收稿时间:2006-12-11
修稿时间:2007-06-04

Construction of eukaryotic expression carrier of recombinant pcDNA3.1-hBMP-7 and transfection into bone marrow stromal cells of rabbit
XUE Zhen, LV Song-cen, ZHAO Jin-dong, et al. Construction of eukaryotic expression carrier of recombinant pcDNA3.1-hBMP-7 and transfection into bone marrow stromal cells of rabbit[J]. The Orthopedic Journal of China, 2007, 15(20): 1570-1573
Authors:XUE Zhen   LV Song-cen   ZHAO Jin-dong   et al
Affiliation:Department of Orthopedics, The Second Clinical College, Harbin Medical University, Harbin 150086, China
Abstract:
Keywords:hBMP-7    genes transfeetion   bone marrow stromal cells
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