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增强型RACE技术克隆辐射诱导小鼠肠上皮新基因RS1
引用本文:王锋超,王军平,粟永萍,高京生,楼淑芬,刘晓宏,任泂,章波.增强型RACE技术克隆辐射诱导小鼠肠上皮新基因RS1[J].中华放射医学与防护杂志,2003,23(5):324-326.
作者姓名:王锋超  王军平  粟永萍  高京生  楼淑芬  刘晓宏  任泂  章波
作者单位:400038,重庆,第三军医大学全军复合伤研究所
基金项目:国家自然科学基金资助项目(39970232,30230360)
摘    要:目的 在获得了辐射诱导小鼠肠上皮新基因RS1 EST序列的基础上获得全长cDNA。方法RT-PCR方法对RS1基因进行表达谱分析,找到表达丰度较高的组织提取总RNA作为模板,应用增强RACE技术即结合生物素探针富集靶cDNA的方法克隆RS1的cDNA末端。结果克隆到RS1片段3′端约2kb的序列。该序列5′端包含已知的RS1片段,3′端具有明显的polyA加尾信号,有编码区的终止密码子。明确了RS1的正、负链及其蛋白编码方向,为RS1 5′端的克隆提供了必要信息。结论 结果与本实验的设计完全一致,说明这一方法对从表达丰度低,难以设计最佳基因特异性引物的EST序列克隆其对应的全长cDNA是可行的,同时为下一步研究RS1在小鼠肠上皮辐射应激反应中的作用和被辐射诱导表达的调控模式奠定了基础。

关 键 词:增强型RACE技术  克隆  辐射诱导  小鼠  肠上皮  基因  RS1
收稿时间:2003/4/10 0:00:00
修稿时间:2003年4月10日

Cloning of radiation-induced new gene RS1 expressed in mouse intestinal epithelium by enhanced RACE
WANG Fengchao,WANG Junping,SU Yongping.Cloning of radiation-induced new gene RS1 expressed in mouse intestinal epithelium by enhanced RACE[J].Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection,2003,23(5):324-326.
Authors:WANG Fengchao  WANG Junping  SU Yongping
Institution:WANG Fengchao,WANG Junping,SU Yongping,et al.The Institute of Combined Injury,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China ,
Abstract:
Keywords:Enhanced RACE PCR  RT-PCR  Probe hybridization  RS1 gene
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