肾小球系膜细胞转化生长因子—β1基因启动子中氧化低密度脂蛋白应签元件的研究

目的：了解在氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL)刺激下，转化生长因子－β1（TGF－β1）基因启动子中顺式作用元件的应答情况。研究在大鼠肾系膜细胞中，Ox-LDL对TGF－β1基因启动子转录活性的影响作用。方法：用聚合酶链反应（PCR）、酶切和亚克隆的方法，构建出5个TGF－β1启动子缺失体一虫荧光素酶（luciferase)报告基因，利用其瞬时转染系膜细胞并检测luciferase相对活性。结果：在Ox-LDL(100mg/L)刺激下，luciferase的活性12h即出现，并于36h达到平台期。对Ox-LDL刺激的应答。TGF－β1启动子－1550到－845之间可能存在着增强子，－629到－422之间则可能有抑制子。计算机软件分析表明，前者内有一转录激活蛋白－1（AP－1）精确识别位点。结论：在大鼠肾系膜细胞TGF－β1基因启动子中，AP－1结合序列（TGAGTCA）可能是应答Ox-LDL的顺式作用元件。Ox-LDL上调TGF－β1的表达至少部分是通过AP－1蛋白来介导的，且Ox-LDL可能通过蛋白激酶C（PKC）信号通路激活AP－1从而正调控TGF－β1基因的转录过程。