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瘦素对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
引用本文:李华青,刘师伟,刘伯轩,赵宝珍,刘卓拉,张悦红,牛勃. 瘦素对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2009, 13(23): 4534-4538. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.23.025
作者姓名:李华青  刘师伟  刘伯轩  赵宝珍  刘卓拉  张悦红  牛勃
作者单位:1. 山西医科大学,山西省太原市,030001
2. 山西医科大学第一医院内分泌科,山西省太原市,030001
3. 山西医科大学第二医院,内分泌科,山西省太原市030001
4. 山西医科大学第二医院,呼吸科,山西省太原市030001
5. 山西医科大学生化与分子生物学教研室,山西省太原市,030001
6. 首都儿科研究所生物技术室,北京市,100020
摘    要:背景:瘦素及其受体在中枢和外周多个部位均有表达,具有多种生物学功能,对于骨代谢有着重要的影响作用,但目前瘦素影响骨重建的机制尚未完全明了.目的:探讨瘦素对入骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/2008-09在山西医科大学生化与分子生物学实验室完成.材料:健康志愿者髂骨骨髓由山西医科大学第二医院提供.瘦素为Sigma公司产品.方法:采用全骨髓法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,传至第3代以1×108L-1密度接种至预置盖玻片的6孔培养板中,设立3组:成骨诱导组添加原代培养液后,再加入含10-8 mol/L地塞米松、10 mmol/L β-磷酸甘油,50 mg/L维生素C的成骨诱导培养基:成骨+瘦素诱导组添加成骨诱导培养基后,再加入50 nmol/L瘦素;空白对照组仅加入含体积分数为10%胎牛血清的LG-DMEM培养液.主要观察指标:骨髓间充质干细胞表面标志表达、钙化结节染色结果、碱性磷酸酶活性,Ⅰ型胶原及骨钙素含量、骨保护素和RANKL蛋白的表达.结果:第3代骨髓间充质干细胞CD44和CD71阳性率分别为95.21%,72.31%,CD34阳性率仅为0.39%.成骨诱导21 d后von Kossa染色可见呈棕黑色的细胞外基质钙盐沉积.诱导14 d与空白对照组比较,成骨诱导组、成骨+瘦素诱导组骨髓间充质干细胞内碱性磷酸酶活性及Ⅰ型胶原、骨钙素含量均明显升高(P<0.05);且成骨+瘦素诱导组各指标升高幅度明显高于成骨诱导组(P<0.05).与成骨诱导组比较,成骨+瘦素诱导组骨髓间充质干细胞骨保护素蛋白的表达明显上调(P<0.05),RANKL蛋白的表达明显下调(P<0.05).结论:瘦素作用于人骨髓间充质干细胞后可促使其向成骨细胞分化,可能通过骨保护素/RANKL途径发挥对骨代谢的调节作用.

关 键 词:骨髓间充质干细胞  瘦素  成骨分化

Effects of leptin on differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into osteoblasts
Li Hua-qing,Liu Shi-wei,Liu Bo-xuan,Zhao Bao-zhen,Liu Zhuo-la,Zhang Yue-hong,Niu Bo. Effects of leptin on differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into osteoblasts[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2009, 13(23): 4534-4538. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.23.025
Authors:Li Hua-qing  Liu Shi-wei  Liu Bo-xuan  Zhao Bao-zhen  Liu Zhuo-la  Zhang Yue-hong  Niu Bo
Abstract:
Keywords:
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