| 运用实时荧光定量RT-PCR和ELISA方法定量检测SHIV的对比分析 |
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| 引用本文： | 刘强,杨贵波,褚亚芬,段丹丽,彭虹,邢辉,邵一鸣.运用实时荧光定量RT-PCR和ELISA方法定量检测SHIV的对比分析[J].中国艾滋病性病,2006,12(4):300-303,310. |
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| 作者姓名： | 刘强 杨贵波 褚亚芬 段丹丽 彭虹 邢辉 邵一鸣 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心,性病艾滋病预防控制中心,北京,100050 |
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| 基金项目： | CIPRA项目;国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的建立一种实时、灵敏、特异的针对人/猴免疫缺陷病毒(SHIV)的RNA载量检测方法,通过与酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较,成为监测SHIV病毒体外复制过程的常用方法。方法体外转录制备RNA标准品,利用TaqMan EZ逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒的反应体系和针对SHIV gag保守区91个碱基的Taq-Man探针与引物,建立一步法实时荧光定量RT-PCR。三种SHIV感染性分子克隆体外转染293T细胞,在不同的时间点采样,通过实时荧光定量RT-PCR和ELISA两种方法监测SHIV病毒复制过程。结果两种方法监测的病毒复制过程基本一致,转染后2~48小时病毒复制出现明显的对数生长期,之后进入平台期,p24浓度大约103pg/ml,而RNA载量大约在108拷贝/ml。两者具有很好的相关性(r2=0.834;P<0.001)。实时荧光定量RT-PCR灵敏度更高,检测范围更广,费用更低。结论所建立的一步法检测SHIV病毒载量的实时荧光定量RT-PCR方法,可以作为监测SHIV体外扩增的常用方法。
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| 关 键 词： | 人/猴免疫缺陷病毒(SHIV) 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 酶联免疫吸附试验(ELISA) 体外复制 病毒定量 |
| 文章编号： | 1672-5662（2006）04-0300-05 |
| 收稿时间： | 2005-12-21 |
| 修稿时间： | 2005-12-212006-02-20 |
Comparison of real-time RT-PCR and ELISA for the quantification of Simian/human immunodeficiency virus |
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| LIU Qiang , YANG Gui-bo , CHU Ya-fen ,et al..Comparison of real-time RT-PCR and ELISA for the quantification of Simian/human immunodeficiency virus[J].Chinese JOurnal of Aids & STD,2006,12(4):300-303,310. |
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| Authors: | LIU Qiang YANG Gui-bo CHU Ya-fen |
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| Institution: | National Center for AIDS / STD Prevention and Control, China Center for Disease Prevention and Control, Beijing 100050, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SHIV Real-time RT-PCR ELISA In vitro virus replication Quantitation |
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